本研究采用ISSR和SRAP兩種分子標記方法對皮球桃(Prunus persica)及其黃肉芽變進行分子鑒定,從DNA水平揭示兩者的遺傳差異。結果顯示,39條ISSR引物共擴增出176個位點,多態性比率為9.7%,遺傳系數為0.95;224對SRAP引物組合共擴增出444個位點,多態性比率為5.0%,遺傳系數為0.97,表明兩者的親緣關系非常相近,遺傳背景基本一致。經過反復篩選與多輪PCR鑒定,引物UBC827、UBC848、組合Me4-Em1在皮球桃與黃肉突變體的基因組中穩定擴增出差異條帶,說明兩者在DNA分子水平確實存在較小程度的差異,遺傳物質發生了微小的變異,證明該黃肉突變體桃的確為皮球桃的芽變。

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【部分圖文】：

圖1 皮球桃(左)和芽變桃(右)

采用1.2%的瓊脂糖凝膠電泳之后于凝膠成像系統下拍照，提取的DNA條帶清晰、完整、明亮(圖2)，表明DNA較完好、無降解；并且核酸蛋白檢測儀顯示OD260/OD280比值在1.8～2.0之間，OD260/OD230在2.0左右，表明其純度較高(表1)，可用于分子標記實驗。圖2桃....

圖2 桃葉基因組DNA瓊脂糖凝膠電泳

圖1皮球桃(左)和芽變桃(右)采用1.2%的瓊脂糖凝膠電泳之后于凝膠成像系統下拍照，提取的DNA條帶清晰、完整、明亮(圖2)，表明DNA較完好、無降解；并且核酸蛋白檢測儀顯示OD260/OD280比值在1.8～2.0之間，OD260/OD230在2.0左右，表明其純度較高(表1....

圖3 部分ISSR引物擴增電泳

經過多次引物篩選及多輪PCR重復，引物UBC-827、UBC848及組合Me4-Em1可以穩定地在皮球桃及其突變體基因組中擴增出清晰、明亮的差異條帶(圖5)，說明ISSR和SRAP分子標記適用于桃變異鑒定。但是兩種分子標記中只有少數引物能穩定擴增出差異條帶，并且多態性條帶數目極少....

圖5 特異片段電泳

本研究通過39條ISSR引物和224對SRAP引物的擴增，結果鑒定了皮球桃與其黃肉突變體的遺傳背景和親緣關系，從DNA分子水平揭示了兩者具有高度相似的遺傳背景，并且遺傳物質存在一定程度的差異，黃肉變異株確實為皮球桃的自然突變體。同時，也表明ISSR和SRAP分子標記技術適用于桃芽....

本文編號：4031419