目的Betatrophin是一種新發(fā)現(xiàn)的主要在肝臟及脂肪組織中表達(dá)的分泌蛋白,近年來研究發(fā)現(xiàn)其可能與糖脂代謝相關(guān)。本研究首次觀察了Betatrophin對db/db小鼠血脂、血糖的作用,并分析了其對糖脂代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響。方法本研究選用2型糖尿病C57BL/Ksjdb/db（db/db）小鼠為動物模型。將8周齡健康SPF級別的db/db小鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對照組,通過小鼠尾靜脈水動力注射方法將空載腺病毒與Betatrophin過表達(dá)腺病毒注射于小鼠體內(nèi),連續(xù)觀察8天。在第8天,通過檢測血清三酰甘油、膽固醇和低密度脂蛋白等指標(biāo)評估其對脂代謝的影響;在第4、6天,分別通過葡萄糖耐量試驗(yàn)和胰島素釋放試驗(yàn)等方法觀察其對血糖、胰島素敏感性的影響;利用Realtime PCR等實(shí)驗(yàn)方法觀察其對磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK）、葡萄糖-6-磷酸酶（G6Pase）、脂肪甘油三酯脂肪酶（ATGL）和血管生成素樣蛋白3（ANGPTL3）等糖脂代謝相關(guān)因子基因表達(dá)的影響。結(jié)果（1）用構(gòu)建并擴(kuò)增的Betatrophin過表達(dá)腺病毒與空載腺病毒感染肝臟原代細(xì)胞,結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組Betatrophin的mR... 

【文章來源】：江蘇大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

綠色熒光蛋白PCR鑒定結(jié)果

將產(chǎn)物進(jìn)行基因檢測，并將結(jié)果于 pubmed 網(wǎng)站進(jìn)行基因比對。結(jié)果顯示無是正向比對還是反向比對，基因比對結(jié)果均相互吻合。驗(yàn)證了本課題組分子克庫的腺病毒的確是 Betatrophin 過表達(dá)腺病毒且具有有效性。比對結(jié)果如圖 2.3。

轉(zhuǎn)染結(jié)果如圖 2.4 所示。在白光鏡頭下可見細(xì)胞形態(tài)正常且分布均勻明細(xì)胞生長狀態(tài)良好。在熒光鏡頭下可見綠色熒光蛋白在細(xì)胞中的表達(dá)。將兩重合后，可以判斷感染效率高于 90%，如圖 2.4。


本文編號：2914217