【摘要】：目的觀察電針百會、四關穴對大鼠局灶性腦缺血再灌注大鼠大腦皮質中Tax1結合蛋白1(TAX1BP1)表達的影響,探討電針抑制核因子-κB(NF-κB)信號通路的激活,發(fā)揮腦保護作用的可能機制。方法 105只健康雄性Sprague-Dawley大鼠隨機分為假手術組、模型組和電針組,每組再分為缺血2 h后再灌注6 h、12 h、24 h、48 h、72 h五個亞組。改良Longa線栓法制備右側大腦中動脈梗死再灌注模型。電針組給予電針百會穴和病側四關(合谷/太沖)穴。檢測各組神經功能,缺血區(qū)大腦皮質中TAX1BP1蛋白的表達情況、TAX1BP1陽性細胞數(shù)、鋅指蛋白A20和胞核NF-κB p65蛋白的表達情況。結果假手術組無神經功能缺損,與模型組相比,電針組在局灶性腦缺血2 h再灌注48 h、72 h時神經功能評分降低(P0.05)。與假手術組相比,模型組在再灌注12h、24 h、48 h時TAX1BP1蛋白表達增加(P0.05);與模型組相比,電針組在再灌注12 h、24 h、48 h、72 h時TAX1BP1蛋白表達進一步增加(P0.05),再灌注24 h為表達高峰。在再灌注24 h后,與假手術組相比,模型組A20表達、TAX1BP1陽性細胞數(shù)、胞核NF-κB p65表達增加(P0.05);與模型組相比,電針組的A20表達、TAX1BP1陽性細胞數(shù)進一步增加(P0.05),胞核NF-κB p65蛋白表達減少(P0.05)。免疫熒光結果顯示,TAX1BP1蛋白主要表達在胞漿,電針組TAX1BP1與A20共表達在胞漿。免疫組化結果顯示,模型組NF-κB p65主要表達在胞核,電針組主要表達在胞漿。結論電針抑制大鼠局灶性腦缺血再灌注后NF-κB信號通路的激活,促進大鼠神經功能恢復,其機制可能是通過上調TAX1BP1蛋白的表達,從而發(fā)揮腦保護作用。
[Abstract]:Objective to observe the effect of electro-acupuncture at Baihui and Siguan points on the expression of Tax1 binding protein 1 (TAX1BP1) in cerebral cortex of rats with focal cerebral ischemia and reperfusion, and to explore the possible mechanism of EA inhibiting the activation of nuclear factor-kappa B (NF-) signaling pathway and playing a protective role in the brain. Methods 105 healthy male Sprague-Dawley rats were randomly divided into sham operation group, model group and EA group. Each group was divided into 5 subgroups: ischemia 2 h, reperfusion 6 h, 12 h, 24 h, 48 h, 72 H 5 subgroup. The right middle cerebral artery infarction model was established by modified Longa suture method. The acupuncture group was given acupuncture at Baihui point and Siguan (Hegu / Taichong) point on the diseased side. The nerve function, the expression of TAX1BP1 protein in the cerebral cortex, the number of TAX1BP1 positive cells, the expression of zinc finger protein A20 and nuclear NF- 魏 B p65 protein were detected. Results there was no neurological deficit in the pseudo-operation group. Compared with the model group, the neurological function score of the electro-acupuncture group decreased at 72 hours after focal cerebral ischemia for 48 hours (P 0.05). Compared with the model group, the expression of TAX1BP1 protein in the model group increased at 12 h, 24 h and 48 h (P 0.05), and compared with the model group, the expression of TAX1BP1 protein increased further at 12 h, 24 h, 72 h and 24 h, respectively, and the expression of TAX1BP1 protein reached the peak at 24 h. After 24 hours of reperfusion, compared with the pseudo-operation group, the expression of A20, the number of TAX1BP1 positive cells and the expression of NF- 魏 B p65 in the nucleus increased in the model group (P 0.05). Compared with the model group, the expression of A20 and TAX1BP1 positive cells in the acupuncture group increased further (P 0.05), and the expression of NF- 魏 B p65 protein in the nucleus decreased (P 0.05). The results of immunofluorescence showed that TAX1BP1 protein was mainly expressed in cytoplasm, and TAX1BP1 and A20 were co-expressed in cytoplasm in EA group. The results of immunohistochemistry showed that NF- 魏 B p65 was mainly expressed in the nucleus in the model group and in the cytoplasm in the acupuncture group. Conclusion EA can inhibit the activation of NF- kappa B signaling pathway and promote the recovery of neural function in rats after focal cerebral ischemia and reperfusion. the mechanism may be to up-regulate the expression of TAX1BP1 protein and thus play a protective role in the brain.
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院神經內科;重慶市神經病學重點實驗室;重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院中西醫(yī)結合科;
【基金】：國家自然科學基金項目(No.30470606;No.81403243) 重慶市渝中區(qū)科技計劃項目(No.20160102) 重慶市衛(wèi)生局中醫(yī)藥科技項目(No.2012-2-128)
【分類號】：R245

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