新煙堿類殺蟲劑是繼氨基甲酸酯類、有機磷類、擬除蟲菊酯類殺蟲劑之后的一類重要殺蟲劑。吡蟲啉和噻蟲嗪分別是第一代和第二代新煙堿類殺蟲劑的的典型代表。吡蟲啉,是近年來國內發展最快的新型硝基亞甲基類殺蟲劑之一,主要用于飛虱、粉虱、蚜蟲等刺吸式口器害蟲的防治,因其具有高效、廣譜、對哺乳動物毒性較低,且有良好的田間穩定性等特點,自1991年吡蟲啉投放市場以來,一直受到全球國際市場的青睞。噻蟲嗪,它與吡蟲啉結構上的差異,導致其對刺吸式口器害蟲和一些鱗翅目害蟲的更高活性,它不僅具有觸殺、胃毒、內吸活性,而且具有更高的活性、更好的安全性、更廣的殺蟲譜及作用速度快、持效期長等特點,目前在新煙堿類殺蟲劑中銷量僅次于吡蟲啉。吡蟲啉和噻蟲嗪的大量使用勢必造成兩者對非靶標生物的生態毒性。本文選取國際公認的生物學模式動物斑馬魚(Danio rerio)作為指示生物,測定其在吡蟲啉和噻蟲嗪0mg/L、0.3mg/L、1.25mg/L、5mg/L暴露染毒7d、14d、21d、28d后的抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD)和過氧化氫酶(CAT)]活性,活性氧(ROS)含量,谷胱甘肽硫轉移酶(GST)活性,丙二醛(MDA)含量...

【文章頁數】：62 頁

【學位級別】：碩士

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中文摘要
Abstract
1. 引言
    1.1 吡蟲啉和噻蟲嗪概述
        1.1.1 吡蟲啉和噻蟲嗪結構和理化性質
        1.1.2 吡蟲啉和噻蟲嗪應用概況
            1.1.2.1 吡蟲啉的應用概況
            1.1.2.2 噻蟲嗪的應用概況
        1.1.3 吡蟲啉和噻蟲嗪的生態毒理學(效應)研究現狀
    1.2 供試生物——斑馬魚概述
    1.3 本實驗測定的各項指標概述
        1.3.1 抗氧化酶系清除活性氧簇機理概述
            1.3.1.1 斑馬魚的超氧化物歧化酶(SOD)概述
            1.3.1.2 斑馬魚的過氧化氫酶(CAT)概述
        1.3.2 斑馬魚的活性氧自由基(ROS)概述
        1.3.3 斑馬魚的解毒酶谷胱甘肽硫轉移酶(GST)概述
        1.3.4 斑馬魚的丙二醛(MDA)概述
        1.3.5 單細胞凝膠電泳(SCGE)概述
            1.3.5.1 斑馬魚肝臟細胞DNA損傷概述
            1.3.5.2 單細胞凝膠電泳實驗概述
    1.4 本文研究內容
2. 材料與方法
    2.1 藥品試劑
    2.2 儀器設備
    2.3 供試生物斑馬魚及染毒方式
    2.4 酶液蛋白質含量的測定
        2.4.1 繪制標準曲線
        2.4.2 樣品蛋白測定
    2.5 抗氧化酶活性的測定
        2.5.1 微粒體懸液的制備
        2.5.2 超氧化歧化酶(SOD)活性測定
            2.5.2.1 試劑配制
            2.5.2.2 SOD比活性的測定
            2.5.2.3 結果與計算
        2.5.3 CAT測定
            2.5.3.1 試劑配制
            2.5.3.2 CAT比活力的測定
            2.5.3.3 CAT比活力的計算
    2.6 ROS的測定
        2.6.1 試劑配制
        2.6.2 肝臟線粒體的制備
        2.6.3 測定方法
    2.7 谷胱甘肽硫轉移酶(GST)測定
        2.7.1 試劑配制
        2.7.2 酶液制備
        2.7.3 測定方法
    2.8 丙二醛(MDA)的測定
        2.8.1 試劑配制
        2.8.2 勻漿組織液的制備
        2.8.3 MDA測定
    2.9 斑馬魚肝臟DNA損傷的測定
        2.9.1 試劑配制
        2.9.2 斑馬魚肝細胞懸浮液的制備
        2.9.3 電泳膠板的制作
        2.9.4 細胞裂解
        2.9.5 DNA解旋
        2.9.6 電泳
        2.9.7 中和、染色
        2.9.8 觀察和分析
    2.10 數據處理
3 結果與分析
    3.1 吡蟲啉和噻蟲嗪對斑馬魚抗氧化酶活性的影響
        3.1.1 吡蟲啉和噻蟲嗪對斑馬魚超氧化物歧化酶(SOD)的影響
        3.1.2 吡蟲啉和噻蟲嗪對斑馬魚過氧化氫酶(CAT)的影響
    3.2 吡蟲啉和噻蟲嗪對斑馬魚活性氧自由基(ROS)的影響
    3.3 吡蟲啉和噻蟲嗪對斑馬魚解毒酶GST的影響
    3.4 吡蟲啉和噻蟲嗪對斑馬魚丙二醛(MDA)含量的影響
    3.5 吡蟲啉和噻蟲嗪對斑馬魚肝臟細胞DNA的損傷
        3.5.1 彗星圖像
        3.5.2 吡蟲啉和噻蟲嗪對斑馬魚肝臟細胞DNA損傷程度(Olive尾矩)的影響
4. 討論
    4.1 吡蟲啉和噻蟲嗪對斑馬魚的氧化脅迫作用
    4.2 吡蟲啉和噻蟲嗪對斑馬魚解毒酶GST活性的影響
    4.3 吡蟲啉和噻蟲嗪對斑馬魚脂質過氧化的影響
    4.4 吡蟲啉和噻蟲嗪對斑馬魚的DNA損傷
    4.5 吡蟲啉和噻蟲嗪的毒性差異
    4.6 各試驗指標結果間的關聯研究
5. 結論
6. 本研究創新之處
7. 參考文獻
8. 致謝
9. 攻讀學位期間論文發表情況



本文編號：4058796