目的:研究caspase-8小發夾RNA（Cap8 shRNA）對人骨髓間充質干細胞（hMSCs）凋亡的調控作用。方法:構建2個靶向人caspase-8基因的穿梭質粒pAd-Cap8 shRNA,并鑒定可有效抑制人HEK293細胞中caspase-8表達的pAd-Cap8 shRNA質粒。構建表達Cap8 shRNA的重組腺病毒質粒,并在HEK293細胞中包裝、擴增重組腺病毒rAd-Cap8 shRNA。檢測rAd-Cap8 shRNA感染的hMSCs中caspase-8 mRNA和蛋白表達。利用annexin V/PI雙染色法和caspase-8活性檢測分析去血清/缺氧誘導的hMSCs凋亡變化,利用熒光定量PCR檢測hMSCs中VEGF、肝細胞生長因子1（HGF）、胰島素樣生長因子（IGF-1）、Bcl-2和Bcl-xL mRNA表達。結果:通過定量PCR篩選到可有效抑制caspase-8表達的pAd-Cap8 shRNA質粒。成功構建Cap8 shRNA的重組腺病毒質粒,并包裝、擴增重組腺病毒rAd-Cap8 shRNA。熒光定量PCR和Western blotting結果證實rA... 

【文章來源】：中國病理生理雜志. 2014年07期 第1172-1178頁 北大核心

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