胰島素樣生長因子-I（IGF-I）是一種多功能的細胞增殖調控因子。重組人胰島素樣生長因子-I（rhIGF-I）是一種很有發展潛力與廣闊臨床應用前景的藥物，現代生物技術的發展為重組hIGF-I的大規模生產提供了可能途徑。 基因工程菌的發酵技術是基因工程藥物大規模生產的必備技術。本研究構建了重組hIGF-I工程菌E.coli BL21（DE3）/pRSET-IGF，對該重組工程菌的生長及產物的表達規律進行了探索，并在此基礎上進行高密度發酵的初步研究，菌體最終發酵密度達OD₆₀₀值20，表達的重組蛋白占菌體總蛋白的25.4％，初步形成了一套重組hIGF-I工程菌發酵的工藝。 重組hIGF-I在重組工程菌E.coli BL21（DE3）/pRSET-IGF中以包涵體的形式表達。針對這一重組蛋白包涵體的洗滌、變性、復性以及最終的分離純化過程進行研究。實驗結果表明，洗滌的包涵體純度可達67.8％；8mol/L尿素及10mmol/L DTT可以使包涵體充分溶解。在復性過程中，采用分步透析逐漸降低尿素濃度的方法，可以有效地提高復性的效率；與此同時，在復性液中加入氧化型... 

【文章來源】：南方醫科大學廣東省

【文章頁數】：66 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中英文縮略語
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 重組hIGF-1工程菌的發酵研究
    材料與方法
    結果
    討論
第二部分 重組人胰島素樣生長因子-Ⅰ的純化研究
    材料與方法
    結果
    討論
結論
參考文獻
綜述 重組人胰島素樣生長因子-Ⅰ研究進展
致謝
在校期間發表文章


【參考文獻】：
期刊論文
[1]重組GM-CSF/IL-3融合蛋白表達菌發酵研究[J]. 張毅,屈賢銘,楊勝利.  工業微生物. 2000(02)
[2]21世紀生物工程藥物的發展與展望[J]. 吳梧桐,王友同,吳文俊.  藥物生物技術. 2000(02)
[3]重組大腸桿菌高密度發酵研究進展[J]. 李民,陳常慶.  生物工程進展. 2000(02)
[4]21世紀新藥研究與開發的展望[J]. 周海鈞.  中國新藥雜志. 2000(01)
[5]重組大腸桿菌的發酵與代謝工程[J]. 張惟材,朱厚礎.  微生物學通報. 1999(04)
[6]利用恒溶氧-補料分批技術高密度培養大腸桿菌生產重組人骨形成蛋白-2A[J]. 李民,陳常慶,樸勤,陳蘇民.  生物工程學報. 1998(03)
[7]國內外基因工程藥物研究開發的現狀和展望[J]. 張驍,束梅英,張韜.  中國藥房. 1998(01)
[8]類胰島素生長因子-Ⅰ的克隆、表達、分離純化與活性檢測[J]. 魏輝俊,黃秉仁,蔡良琬.  中國醫學科學院學報. 1997(05)
[9]基因工程菌的發酵研究[J]. 李會成,李文輝,郭軍,劉利民.  生物工程進展. 1997(02)
[10]原核細胞表達的重組蛋白質復性研究進展[J]. 閻哲.  國外醫學.預防.診斷.治療用生物制品分冊. 1997(01)



本文編號：2910424