目的 以從HCMV AD 169株擴(kuò)增出pp65抗原克隆至真核載體而制備的pp65 DNA疫苗免疫小鼠，觀察其誘導(dǎo)Balb／c小鼠產(chǎn)生的體液免疫和細(xì)胞免疫應(yīng)答，以及細(xì)胞因子的變化，來(lái)證明該疫苗是否具高度免疫性和低毒副作用。對(duì)預(yù)防和治療HCMV感染，特別是防治孕婦和育齡夫婦HCMV感染，預(yù)防神經(jīng)殘疾兒的出生具有重要意義。方法將24只健康Balb／c小鼠隨機(jī)分成A、B及C三組，每組8只。A組(對(duì)照組)：0、2、4周分別于左后腿股四頭肌注入生理鹽水；B組(實(shí)驗(yàn)組 1)：0、2、4周分別于左后腿股四頭肌注入200 ug pp65 DNA疫苗；C組(實(shí)驗(yàn)組 2)：0、2、4周分別于左后腿股四頭肌注入200 ug pp65 DNA加佐劑CpG ODN 10 ug。免疫前3天小鼠接種部位注射0.5mg／ml鹽酸布比卡因50 ul進(jìn)行預(yù)處理，于免疫后第三周斷尾采血，收集血清，末次免疫1周后摘眼球采血，其中0.1ml加EDTA抗凝，余收集血清，間接ELISA法檢測(cè)各組小鼠血清中的pp65抗體效價(jià)；使用間接免疫熒光法，用流式細(xì)胞儀對(duì)CD3⁺、CD4⁺及CD8<...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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圖1:各組免疫小鼠血清的特異性抗體效價(jià)

小鼠血清圖1:各組免疫小鼠血清的特異性抗體效價(jià)Figurel:TitersofthesPeeifieantibodyagainstH日腳PP65m1CeInSerUm-3.2.2特異性體液免疫將B與C組小鼠血清抗體效價(jià)的倒數(shù)取對(duì)數(shù)后進(jìn)行t檢驗(yàn)，見(jiàn)表3:表3:特異性體液免疫(王始)....

圖3Fig3各組免疫小鼠的cD4+T淋巴細(xì)胞百分率

geofspleenCDS+Tlymphoeytesineaeh盯oup89曰︸匕9自g.9圖Fi八匕圖3Fig3各組免疫小鼠的cD4+T淋巴細(xì)胞百分率PereentageofspleenCD4+Tlylnphoeytesineaeh盯oup3.4細(xì)胞因子l卜2檢測(cè)結(jié)果用放射免疫....

圖4各組免疫小鼠第七周血清IL一2的含量

PereentageofspleenCD4+Tlylnphoeytesineaeh盯oup3.4細(xì)胞因子l卜2檢測(cè)結(jié)果用放射免疫法測(cè)得免疫小鼠血清IL一2結(jié)果見(jiàn)表5及圖4:

圖5:各組免疫小鼠第七周血清IFN一Y的含量

5小鼠血清細(xì)胞因子!FN一丫檢測(cè)結(jié)果:各組鼠血清測(cè)得的IFN一YOD值扣除空白對(duì)照on值之后，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出其含量，見(jiàn)表6及圖5:表6:免疫小鼠血清IFN一丫的濃度(pg/m1，王勻)Tab6:TheeoneentrationofIFN一Yinserumofinnnunized....

本文編號(hào)：3998728