本研究基于固相萃取結合超高效液相-串聯質譜法(SPE–UPLC–MS/MS),建立了人體尿液中雙酚A(BPA)的測定方法,從流行病學的角度探討其與子宮肌瘤的關聯性。51例子宮肌瘤患者作為病例組,43例非子宮肌瘤且非激素相關性疾病的婦女為正常組,66例宮頸炎患者(輕度宮頸炎6例、中度宮頸炎30例、重度宮頸炎30例)為陰性對照組,分別收集尿液。尿液樣本加入四溴雙酚A(TBBPA)作為內標,經β-葡萄糖酸酐酶和硫酸酯酶水解后,通過預先處理過的Supelclean C18固相萃取小柱提純、濃縮。采用Waters Acquity UPLC BEH?C18色譜柱(100mm×2.1mm×1.7mm),以0.01mol·L~(-1)乙酸銨水溶液和甲醇作為流動相進行梯度洗脫,三重四極桿串聯質譜采用電噴霧離子源負離子(ESI~-)電離,多反應監測(MRM)模式進行定性和定量分析。方法學驗證結果顯示,該方法在1-100ng·mL~(-1)范圍內,BPA的濃度與峰面積比呈良好線性關系,相關系數不小于0.995(R~2=0.9978);檢出限(S/N=3)和定量限(S/N=10)分別為0.1ng·mL~(-1)和0.3ng·mL~(-1)。高、中、低濃度(1ng·mL~(-1)、5ng·mL~(-1)、20ng·mL~(-1))加標回收率為82.56%-108.50%,相對標準偏差(RSD)低于15%。該方法簡單,準確,選擇性好,靈敏度高,分析速度快,滿足生物樣本的分析要求。將該方法應用于正常組、陰性對照組和病例組尿液樣本中BPA的含量測定,以探討BPA的內暴露與子宮肌瘤疾病的關聯性。43例正常組尿液中檢出BPA的為42例,檢出率為97.7%,暴露分布為1.51ng·mL~(-1)(0.60ng·mL~(-1),2.57ng·mL~(-1));66例陰性對照組尿液中檢出BPA的為61例,檢出率為92.4%,暴露分布為1.97ng·mL~(-1)(0.96ng·mL~(-1),3.27ng·mL~(-1));51例病例組尿液中檢出BPA的為50例,檢出率為98.0%,暴露分布為5.18ng·mL~(-1)(2.74ng·mL~(-1),13.98ng·mL~(-1))。采用非參數檢驗比較三組間BPA暴露水平的差異。結果顯示,病例組尿液中BPA水平顯著高于正常組和陰性對照組(P0.05),但正常組和陰性對照組之間以及陰性對照組中輕度、中度、重度宮頸炎患者之間BPA水平無顯著差異(P﹥0.05)。采用spearman相關分析得到,BPA的暴露水平和子宮肌瘤的數目、大小無顯著相關性(P﹥0.05)。本研究結果揭示,BPA在人體尿液中的暴露普遍存在,且BPA的暴露水平與子宮肌瘤疾病的發生有一定的關聯性。本研究為評價人體BPA內暴露水平提供了可靠的分析方法,并為進一步研究雌激素依賴性婦科腫瘤的發生與BPA暴露的相關性提供了一定的科學依據。
【學位單位】：東南大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：R737.33
【部分圖文】：

經口攝入體內的 BPA 可被胃腸道有效吸收，由于進入體內后，不經過Ⅰ相代謝，主要代謝途徑是在Ⅱ相酶的作用合物和少量的硫酸酯綴合物，降低或消除雌激素樣活性；同時，性，使其可從血液中迅速清除，通過腎臟隨尿液排出體外，半衰時）[12,14]。目前，已有許多文獻報道，在高比例人群的血液、尿 BPA[15,16]。2013 年，美國疾病防控中心（CDC）的調研發現，2有 95%的樣品檢出了 BPA[17]。值得注意的是，由于嬰幼兒血腦屏，人體乳汁、羊水、卵泡液以及臍帶血中 BPA 的存在使各國學者究發現兒童尿液中的 BPA 濃度與其父母表現出相關性且普遍高敏感性以及 BPA 的潛在毒性，自 2008 年，加拿大、美國、歐盟在嬰幼兒食品容器及包裝材料生產中使用 BPA 及其它針對 BPA國衛生部等 6 部門也于 2011 年 5 月發出第 15 號公告，禁止生產、]。

東南大學碩士學位論文尿液樣品的 MRM 色譜圖見圖 3。BPA 保留時間為 2.39min，TBBPA 保留時間為 2.92min，峰形良好。TBBPA

東南大學碩士學位論文尿液樣品的 MRM 色譜圖見圖 3。BPA 保留時間為 2.39min，TBBPA 保留時間為 2.92min，峰形良好。圖 2 BPA 和 TBBPA 標準溶液 MRM 色譜圖TBBPATBBPABPA
【參考文獻】

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本文編號：2885652