抗病毒及抗膜補體調節蛋白雙特異性抗體的制備及效應研究
發布時間:2024-06-08 07:13
補體系統在機體的抗病毒免疫中處于一線防御地位,是病毒建立感染所必須面對和克服的機體的第一道防線。作為機體重要的天然免疫防御系統及特異性體液免疫應答的重要效應系統,補體系統除了具有溶解、清除病毒等致病微生物,阻止病毒進入靶細胞,調理病毒的吞噬等重要功能外,還可通過“識別”自身組織細胞表面的補體活化調節蛋白來對自身細胞加以保護,使之不受侵害。遺憾的是,一些有包膜的病毒也在長期的演化過程中獲得了補體系統的這種自我保護機制,即可以通過結合宿主膜補體調節蛋白來逃避補體的攻擊。病毒免疫逃避的機制也可能是我們尋求有效的抗病毒治療的靶點。因此我們設想,1)是否可以通過封閉病毒表面補體活化調節蛋白的功能來消除病毒逃避補體攻擊的機制,恢復病毒對補體攻擊的敏感性?2)由于膜補體調節蛋白在體內廣泛表達,是否可以通過制備針對病毒及其表面補體活化調節蛋白的雙特異性抗體來實現特異性封閉病毒表面的補體調節蛋白,同時利用抗體的Fc段誘導內源性補體活化,提高補體抗病毒的效率的目的? 為了驗證我們的設想,本研究進行了下面三部分的實驗。 1.以嚴重危害人類健康,且具有復雜免疫逃避機制的有包膜的HIV病毒及痘苗...
【文章頁數】:147 頁
【學位級別】:博士
【部分圖文】:
本文編號:3991647
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【部分圖文】:
圖I一6:CD59在EEV上存在的westernBlot結果,結果示Hela細胞(5)及三組純化
2345EEv上存在的westernBlot結果,結果示Hela(1)細上(3,4,5)有特異性的條帶,分子量為70kd左右,。2345
圖2一3:SDS一隊GE結果顯示抗體純化后條帶均一
3579111315171921232527293133353739管號圖2一1兔抗EEV抗體純化洗脫圖C的e司OO圖2一2:CD55單抗純化洗脫圖
圖3一l:CD55單抗雜交瘤細胞DG3總RNA的提取電泳圖,圖示RNA電泳的完整性好,三條帶清晰
使液體被吸收。培養12一16小時,可見菌落長提取后,分別進行限制性內切酶選及鑒定:按試劑盒說明書進行(上海華舜co班酶切篩選插入PCR擴增產aRa公司完成BL基因庫檢索(網址)燈embl/Submission/webin.html鑒定:將提取的總RNA進行電泳型完整,沒有明顯的降....
圖3一2CD55單抗VH、VL的PCR擴增,圖示CD55單抗重鏈及輕鏈均有特異性條帶出現,大小分別為35obp(1)及31obp(2)左右,與預期的分子量相符
‘一185~55圖3一l:CD55單抗雜交瘤細胞DG3總RNA的提取電泳圖,圖示RNA電泳的完整性好,三條帶清晰。提示可以用作下一步RT一PCR模板。
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