在世界范圍內(nèi),各國(guó)的腫瘤發(fā)病率和死亡率都呈現(xiàn)逐年上升的趨勢(shì),使之成為威脅人類健康和亟待解決的惡性疾病。近年來(lái),在腫瘤疾病的研究中,利用基因載體來(lái)遞送特殊基因并促進(jìn)所需治療性蛋白質(zhì)表達(dá)的方法,成為人們關(guān)注的焦點(diǎn),有望為未來(lái)腫瘤治療提供新的安全有效的技術(shù)手段。基于上述考慮,在本論文中首先將N-甲基二乙醇胺,癸二酸二乙酯和ω-十五內(nèi)酯通過(guò)脂肪酶催化聚合成陽(yáng)離子聚胺酯,然后利用季銨化反應(yīng)將疏水性N-（2-溴乙基）氨基甲酰基膽固醇接枝到其主鏈上,制備出新型兩親共聚物Chol-g-PMSC-PPDL。該載體材料能夠與DNA進(jìn)行良好的組裝,形成穩(wěn)定的納米復(fù)合物,同時(shí)由于疏水性片段的引入,該載體表現(xiàn)出利于細(xì)胞攝取的特性并且有效地促進(jìn)p53質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染。我們以宮頸癌HeLa細(xì)胞（p53野生型）、人前列腺癌PC-3細(xì)胞（p53缺失型）為細(xì)胞模型,系統(tǒng)評(píng)價(jià)該載體介導(dǎo)p53基因遞送、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞增殖、遷移及浸潤(rùn)的效果與分子機(jī)制。遞送48小時(shí)后,由于p53蛋白的大量表達(dá),兩種細(xì)胞系均產(chǎn)生明顯的增殖抑制現(xiàn)象。同時(shí),該納米載體復(fù)合物（Chol-g-PMSC-PPDL/p53）能夠通過(guò)外源基因的表達(dá),增強(qiáng)HeLa細(xì)胞和... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

miRNA的作用機(jī)制siRNA：是一組長(zhǎng)度為20-25個(gè)核苷酸的雙鏈RNA，與mRNA作用機(jī)制類似，通過(guò)體外合成的siRNA進(jìn)入細(xì)胞后與靶mRNA互補(bǔ)配對(duì)，使靶基因降解

圖 1.2 siRNA 的作用機(jī)制1.2.2.3 核酶核酶是一種生物催化劑，是具有催化功能的 RNA 分子，它能夠通過(guò)識(shí)別特定的序列來(lái)降解 mRNA。它們通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則特異性識(shí)別 mRNA，催化靶位點(diǎn) mRNA 鏈中的磷酸二酯鍵斷裂，選擇性地剪切 mRNA 分子，從而阻斷靶基因的表達(dá)。近幾年，人們又合成了一些具有催化活性的 DNA，稱作脫氧核酶。與原有的 RNA 核酶相比，這種雙鏈的脫氧核酶更穩(wěn)定，不易被 RNA 酶降解，同時(shí)它也更容易合成和修飾，產(chǎn)生的多種類似物能夠更好的應(yīng)用到基因治療中[3]。1.2.3 p53 基因

圖 1.3 p53 凋亡信號(hào)通路P53 蛋白為 p53 基因編碼的產(chǎn)物，它的 N 端為酸性區(qū)，還有 1-80 位氨基酸殘基，C 端為堿性區(qū)，含有 319-393 位氨基酸殘基，正常的 p53 蛋白在細(xì)胞中易水解，半衰期為 20 分鐘，突變的 p53 蛋白半衰期為 1.4-7 小時(shí)不等。研究顯示，p53 蛋白能夠改變線粒體途徑中的 DNA 修復(fù)蛋白和促凋亡蛋白從而影響細(xì)胞的生長(zhǎng)和凋亡等過(guò)程[8]，同時(shí)它還控制著細(xì)胞周期的啟動(dòng)。在健康的細(xì)胞中，若細(xì)胞受損又無(wú)法修復(fù)，則會(huì)向 p53 蛋白發(fā)送信號(hào)，p53 蛋白啟動(dòng)凋亡過(guò)程，使細(xì)胞通過(guò)凋亡途徑死去；若 p53 蛋白缺失或有缺陷，喪失了原有的功能，則無(wú)法控制細(xì)胞，使其繼續(xù)分裂，導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。2007 年，美國(guó)生物技術(shù)公司 Introgen 研發(fā)的 p53 基因藥 Advexin 問(wèn)世。Advexin 是以非整合性和非復(fù)制性腺病毒為載體遞送 p53 基因，該藥物主要針對(duì)難治性頭頸部腫瘤的治療。頭頸部實(shí)體腫瘤多為 p53 表達(dá)缺陷型腫瘤，通過(guò)腺病毒的遞送使癌癥細(xì)胞內(nèi) p53 蛋白表達(dá)恢復(fù)到正常水平，抑制腫瘤生長(zhǎng)達(dá)到治療目

【參考文獻(xiàn)】：
博士論文
[1]中國(guó)慢性病前瞻性研究隊(duì)列惡性腫瘤發(fā)病與死亡分析[D]. 潘睿.南京醫(yī)科大學(xué) 2017
[2]新型PEI衍生物材料的合成及在腫瘤基因遞送中的應(yīng)用研究[D]. 王艷波.吉林大學(xué) 2014



本文編號(hào)：2907450