模式識別受體（PRRs）在先天免疫中起著不可替代的作用,通過識別各種“自已”和“非已”成分,把這種信息傳導給下游的效應分子,有的模式識別受體可以直接發揮功能,清除異已成分。清道夫受體（SRs）和C-型凝集素（CTLs）都是模式識別受體中非常重要的成員,本研究選取日本囊對蝦（Marsupenaeus japonicus）為實驗動物,研究了一種B類清道夫受體MjSR-B1和一個含有卷曲螺旋結構域的C-型凝集素MjcLec在先天免疫中的作用。1.日本囊對蝦B類清道夫受體MjSR-B1的功能研究清道夫受體通過識別病原相關分子模式（PAMPs）參與先天免疫,同時通過識別損傷相關分子模式（DAMPs）參與疾病的發生。雖然在脊椎動物中清道夫受體已經得到深入研究,但是它們在無脊椎動物先天免疫中的作用仍需要進一步闡明。我們從日本囊對蝦中鑒定出一種B類清道夫受體,命名為MjSR-B1。 MjSR-B1主要分布在血細胞、心臟、肝胰腺中,在受到鰻弧菌和金黃色葡萄球菌刺激以后,對蝦血細胞中的MjSR-B1的mRNA表達水平上調。MjSR-B1胞外結構域的重組蛋白rMjSR-B1可以凝集革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌... 

【文章來源】：山東大學山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．２清道夫受體的結構示意圖

２．?ＭｊＳＲ－Ｂｌ的組織分布和隸法模式??用ｑＲＴ－ＰＣ民分析ＭｊＳＲ－Ｂｌ的組織分布。結果表明ＭｊＳＲ－Ｂｌ主要表達在血細??胞、屯、臟和肝膜腺中，而飯、胃和腸中則幾乎沒有表達（圖２．４Ａ）。ＭｊＳＲ－Ｂｌ在??血中受到輯弧菌和金黃色葡萄球菌刺激后的表達模式也用ｑＲＴ－ＰＣ艮檢測。圖??２．４Ｂ表明ＭｊＳ民－Ｂ１的表達水平在受到自曼弧菌刺激Ｗ后２?ｈ和４８?ｈ上調，而受到??金黃色葡萄球菌刺激Ｗ后從２?ｈ?—直到４８?ｈ都昆著上調（圖２．４Ｃ）。??Ａ?２。［??！祉??０?ｑＬＷＬＭＩ?ＷＩ?■?—ｉ?？—??己?口?ＰＢＳ?Ｃ??３「?＊?Ｂ５Ｉ?Ｖ．?ａｎｇｕｉＨａｒｕｍ?１〇．?＇?＇?ＰＢＳ??Ｉ＊?ｇ?＊?■■?Ｓ．ａｕｒｅｕｓ??ｎｉ?ＩＪ?Ｃ?ｎｉ?Ｌｌ?Ｌ??ｎ；＾?礦々令護?公護護??Ｔｉｍｅ?ｐｏｓｔ?ｃｈａｌｌｅｎｇｅ?Ｔｉｍｅ?ｐｏｓｔ?ｃｈａｌｌｅｎｇｅ??圖２．４?ＭｊＳ民－Ｂ１的表達模式。（Ａ）?ＭｊＳＲ－Ｂｌ的組織分布用ｑＲＴ－ＰＣ民檢ｉｉ，ｐ－ａｃｄｎ作為內參。??（Ｂ和Ｃ）對郵受到媛弧菌和金黃色葡萄球苗刺激Ｗ后ＭｊＳＲ－Ｂｌ在血細胞中的表達模式分??析

２．５Ａ），這個重組蛋白包括ＭｊＳＲ－Ｂｌ的胞外結構域（４６．９０?ｋＤａ）和陸ｓ－ｔａｇ標簽??（２２．８ｋＤａ），所Ｗ總的分子量在７０ｋＤａ左右，大小符合預期。ｒＭｊＳＲ－Ｂｌ可Ｗ凝??集八種不同的細菌，凝集作用依賴于巧離子（圖２．５Ｂ），最小凝集濃度（ＭＡＣ）??如表２．２所示。??Ａ?Ｂ??Ｈｉｓ－ｔａｇ?Ｈｉｓ＿ｔａｇ?＋?Ｃａ。＊??１?化．０?——??６６．２?．申編??Ｗ?ｎ??？?ｒＭｊＳＲ－Ｂ１?ｒＭｊＳＲ－Ｂ１?＋?Ｃａ；＊??－?ｍｍ??Ｍ?１?２?３臨－＇呼一鄕??ｍｍｉ?Ｕ?劍??圖２．５ＭｊＳＲ－Ｂｌ凝集細菌。（Ａ）?ＭｊＳＲ－Ｂｌ胞外結構域的重組表達和純化。用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ檢??測ｒＭｊＳ民－Ｂ１在大腸桿菌中的表達。泳道Ｍ表示蛋白分子量標準，泳道１表示誘導前含??ｐＥＴ－３２ａ－ＭｊＳＲ－Ｂｌ的大腸桿菌，泳道２表示ＩＰＴＧ誘導后的大腸桿菌，泳道３表示純化后的??ＭｊＳＲ－Ｂｌ。（Ｂ）重組表達的ＭｊＳＲ－Ｂｌ凝集細菌。圖中出示的是媛孤菌的凝集效果。ｐＥＴ－３２ａ（＋）??標簽蛋白作為對照。??Ｆｉｇ．?２．５?ＭｊＳＲ－Ｂｌ?ａｇｇｌｕｔｉｎａｔｅｄ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｂａｃｔｅｒｉａ．?（Ａ）?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ａｎｄ?ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｈｅ??ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ?ｒｅｇｉｏｎ?ｏｆ?ＭｊＳＲ－Ｂｌ．?ＳＤＳ－ＰＡＧＥ?ｗａｓ?ｕｓｅｄ?ｔｏ?ｌｅｓｔ?也ｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ｒＭｊＳＲ－Ｂｌ?ｉｎ?Ｅ．??Ｉ?？??ｃｏｌＬ?Ｌａｎｅ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｍａｒｋｅｒ；?Ｌａｎｅ?１


本文編號：2897300