本文是一篇專業(yè)的醫(yī)學論文，主要是對Pim-1激酶小分子抑制劑的研究進展的闡述，詳情請看下面的介紹。

　　在癌細胞，如白血病，淋巴瘤，以及前列腺癌中過表達Pim-1具有致命作用[9]，而在正常細胞中沒有。因此，與傳統(tǒng)的化學治療方法相比，抑制Pim-1激酶不會有有害的副反應。多種特異性和潛在的Pim-1激酶抑制劑也已經表現(xiàn)出誘導癌細胞凋亡，增加癌細胞對化療的敏感性以及協(xié)同其他抗癌藥物作用，如抑制Pim激酶可以增強蘇尼替尼對腎細胞癌的活性[10]，Pim-1作用于Akt下游，可以調解地氟烷誘導和心肌缺血后適應性，增加心肌細胞存活[11]。Pim-1抑制劑ETP-45299與PI3K抑制劑GDC-0941合并使用，對MV-4-11 AML細胞有很強的協(xié)同作用[12]，與Bcl-2家族的小分子抑制劑ABT-737聯(lián)合使用，體內和體外均引起前列腺癌細胞顯著凋亡[13]。因此，Pim-1激酶是一個很有前景的治療靶點。

　　Pim-1的結構特點

　　在典型的絲/蘇氨酸或蘇氨酸激酶中，ATP和鉸鏈區(qū)形成兩個氫鍵：一個是嘌呤的NH2作為供體與鉸鏈的羰基形成氫鍵，另一個是受體在嘌呤N-1和激酶的骨架NH之間聯(lián)系。在Pim家族中這個殘基是脯氨酸，因此同樣的氫鍵相互作用不存在（圖1）[14-15]。由于鉸鏈區(qū)脯氨酸殘基Pro123的存在，Pim-1激酶區(qū)域僅通過一個氫鍵結合天然底物ATP。脯氨酸的存在使Pim-1與其他的激酶顯著不同[16]。這個鉸鏈區(qū)域是由Leu120，Glu121，Arg122和Pro123構成[9，17]，Pim-1結構另一個重要區(qū)域是富含谷氨酸磷酸鹽結合彎曲部分（P-loop），包含氨基酸殘基：Gly45，Ser46，Gly47，Gly48，Phe49和Gly50。嵌入物和脯氨酸共同引起了鉸鏈區(qū)的擴張并形成了更大的空間，以便抑制劑占領并發(fā)揮作用。

　　近年來報道的有關Pim-1小分子抑制劑結構種類很多[9，17-22]。包括黃酮類、咪唑并[1，2-b]噠嗪、吡唑并[1，5-a]嘧啶和3-芳基-6-氨基-三唑并[4，3-b]噠嗪、苯亞甲基-噻唑烷-2，4-二酮、吡咯并[2，3-a]咔唑、苯并呋喃-2-羧酸類、取代的吡唑酮類、高效有機釕衍生物（III）等。黃酮類也抑制其他幾種激酶，使得這些化合物作為Pim-1抑制劑的用途不是很清楚。咪唑并[1，2-b]-和三氮唑并[4，3-b]-哌嗪（II）是一種高效選擇性Pim-1抑制劑，在納摩爾濃度就有抑制活性[22-23]。此外，異惡唑并[3，4-b]喹啉酮及其類似物是一類在納摩爾濃度就有效的高選擇性的新型Pim-1和Pim-2抑制劑。

　　1 吲哚咔唑和二吲哚順丁烯二酰亞胺衍生物

　　一些吲哚咔唑和二吲哚順丁烯二酰亞胺衍生物具蛋白激酶抑制活性，研究發(fā)現(xiàn)星孢菌素和結構相關的二吲哚順丁烯二酰亞胺類化合物1，2和3（圖2）在1 ?mol/L時可產生90%的Pim-1抑制作用。這類化合物與Pim-1的結合特點表明，Pim-1鉸鏈骨架通過Glu121的羰基氧與順丁烯二酰亞胺的NH形成氫鍵作用，而Pro123的存在使得鉸鏈區(qū)與順丁烯二酰亞胺羰基無其他的氫鍵作用。盡管化合物1沒有二面角構象，仍能很好的固定到ATP結合縫隙中，其吲哚部分被氨基酸殘基Leu44，Phe49，Val52，Ala6，Ile104，Leu120，Leu174和Ile185通過疏水接觸包裹，產生穩(wěn)定的疏水作用力。

　　2 咪唑并[1，2-b]噠嗪類和吡唑并[1，5-a]嘧啶類

　　Bullock等[14]首次報道咪唑并[1，2-b]噠嗪類化合物4-6（圖3）和吡唑并[1，5-a]嘧啶類化合物10（圖3B）在納摩爾濃度對Pim-1有抑制活性，且對Pim-1的選擇性是Pim-2的100倍[14]。化合物4具有抗白血病活性，X光衍射顯示化合物4結合到Pim-1的ATP結合位點上，Lys67的N-1位的氮原子參與氫鍵作用，抑制劑與殘基Leu44，Phe49，Ile104和Leu120之間有疏水穩(wěn)定作用。化合物5誘導人白血病細胞系MV-4-11凋亡，減少Pim下游靶點的磷酸化；在體外可減少初期白血病的發(fā)生。咪唑并[1，2-b]噠嗪類（圖3A）被認為是ATP競爭性抑制劑而不是ATP類似物[1，24-25]。在各種咪唑并[1，2-b]噠嗪中化合物8和9（圖3A）活性較好。進一步構效關系研究發(fā)現(xiàn)R2疏水作用對選擇性和去溶劑化的影響不大，R1對活性影響較大。R1、R2結構優(yōu)化獲得的化合物6對Pim-1的IC50是39 nmol/L。

　　ETP-45299是一個有效的選擇性Pim-1抑制劑，能抑制Bad和4EBP1的磷酸化，阻止人細胞系中實體瘤和非實體瘤細胞的增殖。ETP-45299與PI3K抑制劑GDC-0941合并使用，對MV-4-11 AML細胞有很強的協(xié)同作用，這表明合并使用選擇性Pim激酶抑制與PI3K抑制劑可能會產生很好的臨床效益[12]。

　　SGI-1776是由SuperGen公司最初通過虛擬篩選得到的一個化合物，已進入I期臨床試驗。該化合物對Pim-1，Pim-2，Pim-3都具有較高的抑制作用，能夠誘導慢性淋巴細胞白血病細胞的凋亡；最近Hospital等[26]提出SGI-1776抗白血病的機制是直接抑制FLT3激酶在AML中的活性。SGI-1776還可以誘導前列腺癌細胞中的細胞周期停滯和凋亡，與雄性激素-依賴性細胞相比，在雄性非依賴細胞中具有顯著的細胞毒性效應。最重要的是SGI-1776可使對化療藥物耐藥的前列腺癌細胞系對紫杉醇再敏化。體內腫瘤模型實驗初步研究顯示SGI-1776具有治療效果[27]。

　　3 異惡唑并[3，4-b]喹啉-3，4（1H，9H）-二酮類

　　以異惡唑并[3，筆耕文化推薦期刊，4-b]喹啉-3，4（1H，9H）-二酮為骨架的化合物，最初是由Abbott實驗室開發(fā)作為Pim-1抑制劑，其中化合物11（圖4A）在納摩爾濃度對Pim具有抑制活性，化合物12（圖4A）對Pim-1的抑制作用是IC50=2.5 nmol/L，是該類中最高效的Pim-1抑制劑。Abbott實驗室進一步研究得到的化合物13（圖4A）對Pim具有很高的抑制活性和選擇性（IC50=2.5 nmol/L）。研究以異惡唑并[3，4-b]喹啉-3，4-（1H，9H）-二酮為骨架作為潛在的Pim-1和Pim-2激酶抑制劑的構效關系表明，R2可以為多種烷基基團，R3只能是小基團，如質子，甲基，以維持分子的抑制活性[18]。

　　4 吡啶酮類衍生物

　　吡啶酮類衍生物是Valeant Pharmaceuticals R&D從160 000個化合物中篩選得到[19]，其中化合物14（圖4B）活性最高（IC50=50 nmol/L），這一類化合物與Pim-1的復合物X光-單晶衍射分析推測，該類化合物是ATP競爭性抑制劑。化合物14與鉸鏈區(qū)唯一有潛在相互作用的部位是R1苯環(huán)的左側，這個復雜的結構被定義為Glu121的主要羰基與R1芳香氫（C-3）的弱氫鍵作用（C=O…H-C）。Glu121的羰基與芳香族C-4的氫之間的氫鍵可能也有助于穩(wěn)定化合物14與Pim-1的鉸鏈區(qū)。化合物14的結合可競爭性地抑制ATP的利用，從而抑制了Pim-1的功能[19]。

　　5 苯亞甲基-噻唑烷-2，4-二酮類[28]