摘要：利用195份矮敗小麥與津強5號雜交得到的高代品系，研究了7OE亞基在其中的分布，探討7OE亞基材料與揉面特性之間的關系。結果表明，195份材料中有6份材料擴增出447 bp的片段，占所檢測品系的3.07%。7OE亞基對小麥的揉面特性部分指標有顯著的正面影響，峰值高度、8分鐘帶寬在有無7OE基因間變異系數差別較大，含7OE亞基材料與非7OE亞基材料在8分鐘帶寬這一指標達到極顯著差異。7OE亞基對改良小麥品質作用較大，8分鐘帶寬可作為品質分析的重要指標之一，此標記特異性較好，筆耕論文，可用于中國小麥的品質改良。
　　Study on 7OE Subunit Introduction and Flour Mixing Properties of Wheat
　　WANG Jian-he, LIANG Dan, SHI Xiao-wEi, FENG Gang,WANG Cong-lEI, SHI Si-fa,WANG Ji-zhong
　　(College of Gardens and Horticulture, Qingdao Agriculture University, Qingdao, Shandong 266109, China)
　　Ａｂｓｔｒａｃｔ: With aim to investigate the presence of the subunit 7OE and its relationship of the quality parameters, a total of 195 advanced lines from the dwarf male-sterile wheat and Jinqiang 5 were tested by a STS markers and mixograph factors. The results suggested that the markers TaBAC1215C06-F517/R964 could amplify a 447-bp in 6 lines, which indicated the presence of Bx7OE in these lines, with a frequency of 3.07%. The subunit 7OE that had a significantly better effect on mixograph factors showed more positive effects than its alternative alleles on peak time and eight minute width, and significantly better effects on eight minute width than non-7OE. Therefore, the study suggested that eight minute width might be a potential factor for improvement of quality; the STS marker could be used to detect the presence of Bx7OE gene in wheat quality improved in China.
　　小麥貯藏蛋白決定小麥的品質特性，決定面團的彈性和延伸性。高分子量麥谷蛋白亞基（HMW-GS）僅占小麥貯藏蛋白的10%，但對加工品質起著決定性作用。HMW-GS由染色體1A、1B、1D長臂上的位點控制，這些位點總稱為GLu-1位點。不同HMW-GS亞基對面團特性和烘烤品質有著不同的影響。Glu-A1編碼的1和2*亞基，Glu-B1編碼的7+8、17+18、13+16和14+15亞基以及Glu-D1編碼的5+10亞基均對面包加工品質有正向作用[1-2]。近年研究發現，1Bx基因的復制導致7亞基的超量表達，這可以顯著提高面團強度 [6-7]。國內對7OE亞基也進行了初步研究。張平平等[4]選用13份含7OE亞基姊妹系材料，利用反相高效液相色譜分析法（RP-HPLC）和凝膠色譜（SE-HPLC）方法研究了含Glu-B1al（7OE＋8）材料的HMW-GS總量和面團強度。任妍等[5]利用兩對STS引物驗證了檢測7OE引物的特異性，為其快速檢測提供了方法。
　　矮敗小麥是用“矮變1號”給太谷核不育小麥授粉，F1不育株再用高稈品種測交所得，中國自主創新的重大科技成果。矮敗小麥的后代群體中一半是異交結實的矮稈雄性不育株和一半自交結實的非矮稈可育株，是理想的輪回選擇工具[3]。津強5號品質達國家一級強筋小麥標準，且各項品質指標與加麥和硬紅春相仿，經張平平等[4]檢測含7OE亞基。
　　Ragupathy 等[8]根據LTR 逆轉座子邊界與重復片段的結合區域設計了兩個STS 標記并檢測了400 多份小麥品種，經任妍研究能有效鑒定7OE基因，這為快速準確檢測7OE基因在本群體中的分布提供了可能。本研究對195份矮敗小麥與津強5號雜交得到的高代品系7OE亞基進行分子檢測，明確此位點等位基因的分布規律，并檢測這批材料的揉混特性，為我國小麥育種提供有用的材料以及分子標記輔助選擇方法。
　　
　　1 材料和方法
　　
　　1.1 供試材料
　　195份以津強5號作為輪回親本與矮敗小麥回交2次的高世代品系，2009年種植于天津市武清區周莊村，每區2行，行長2 m，行距30 cm，5 cm點播。對其中9份農藝性狀優良的非7OE亞基和6份含7OE亞基材料于2010年進行進一步擴繁，分析其揉混特性。
　　1.2 基因組提取
　　采用SDS法提取小麥基因組DNA[9]。每份材料分別提取二粒種子的DNA，利用紫外分光光度計檢測DNA濃度，終濃度調整至20 ng·μL-1。
　　1.3 STS標記檢測
　　利用Ragupathy等[8]開發的顯性STS標記檢測Bx7OE基因。引物由天津潤泰科技發展有限公司合成。
　　標記（重復片段與逆轉座子左邊結合引物）：TaBAC1215C06-F517：5'-ACGTGTCCAAGCTTTGGTTC-3'，
　　TaBAC1215C06-R964：5'-GATTGGTGGGTGGATACAGG-3'；
　　PCR反應體系為20 μL，含10×PCR Buffer 2 μL，d NTP（A、T、C、G）各200 μmol·L-1，每條引物1 μL (10 mmol·L-1)，Taq DNA聚合酶（Takara）1 U，模板DNA 50 ng。標記1的PCR反應程序為：94 ℃變性5 min；94 ℃變性30 s，63 ℃退火30 s，72 ℃延伸1 min，35個循環；72 ℃延伸5 min。

 

本文編號：7469