目的:分析不均一核糖核蛋白A2/B1(heterogeneous nuclear ribonucleoproteinA2/B1,hnRNPA2/B1)基因對宮頸癌細胞的平板克隆形成、轉移、侵襲能力和增殖能力、細胞周期的影響;以及探討其改變宮頸癌細胞化療藥物敏感性及作用機制。方法:設計含有hnRNPA2/B1 shRNA(short hairpin RNA,shRNA)干擾序列4對、陰性對照1對。構建含靶向hnRNPA2/B1 shRNA的重組慢病毒質粒,并穩定轉染Caski細胞、Hela細胞,qRT-PCR檢測hnRNPA2/B1 mRNA表達水平,Western blot檢測hnRNPA2/B1蛋白表達水平;分別用平板克隆形成實驗、劃痕實驗、細胞侵襲實驗檢測細胞的生物功能;MTT比色法檢測細胞的增殖能力、洛鉑(Lobaplatin)作用于細胞的IC50、伊立替康(Irinotecan Hydrochloride)作用于細胞的IC50;流式細胞術分析hnRNPA2/B1基因沉默后細胞周期以及洛鉑、伊立替康對細胞凋亡作用的改變;用qRT-PCR和Western blot檢測相關基因bax...

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.pGMLV-SC1RNAi慢病毒載體圖譜

貴州醫科大學2016屆科學學位碩士研究生學位論文CaSki細胞,中文名稱人宮頸癌腸轉移細胞，形態上皮細胞，購自中院細胞庫。含有完整的HPV-16(每個細胞大約600個拷貝)和HPV-18相HeLa細胞，中文名稱人宮頸癌細胞，形態上皮細胞，購自中國科學庫。含有人乳....

圖2慢病毒干擾載體的序列對比圖譜

NC-ShNRA序列對比圖2慢病毒干擾載體的序列對比圖譜Fig.2mapofSequencelentiviralinterferedvectorShNRA-1序列對比ShNRA-2序列對比

圖3慢病毒干擾載體的序列對比圖譜

NC-ShNRA序列對比圖2慢病毒干擾載體的序列對比圖譜Fig.2mapofSequencelentiviralinterferedvectorShNRA-1序列對比ShNRA-2序列對比

圖4慢病毒shRNA感染細胞熒光照片

圖4慢病毒shRNA感染細胞熒光照片AhnRNPA2/B1-shRNA1一號孔，BhnRNPA2/B1-shRNA1六號孔，ChnRNPA2/B1-shR一號孔.DhnRNPA2/B1-shRNA2六號孔，EhnRNPA2/B1-shRNA3一號孔，FhnR....

本文編號：4002155