【摘要】：β細胞分泌的胰島素是機體內(nèi)唯一降低血糖的激素,胰島β細胞凋亡導(dǎo)致胰島素分泌不足是2型糖尿病發(fā)病的關(guān)鍵因素之一,所以抑制胰島β細胞凋亡對于2型糖尿病的發(fā)生發(fā)展具有重要意義。GLP-1類似物Exendin-4具有抑制胰島β細胞凋亡,促進胰島素分泌水平,降低血糖等作用,已成為臨床治療2型糖尿病的一線藥物。然而Exendin-4抗2型糖尿病β細胞凋亡的分子機制仍不完全清楚。細胞色素c氧化酶A2(cytochrome c oxidaseⅥA2,COX6A2)是細胞色素c氧化酶(線粒體呼吸鏈復(fù)合物Ⅳ)的13個亞基之一,可以調(diào)節(jié)線粒體功能從而影響細胞存活,通過調(diào)節(jié)酶的活性在心肌細胞和骨骼肌細胞熱生成中發(fā)揮作用等。法尼酯X受體(Farnesiod X receptor,FXR)作為核受體,調(diào)節(jié)機體對胰島素敏感性,并對糖脂代謝具有重要作用,但其對胰島β細胞凋亡的作用未見報道。本論文主要探討:1)Exendin-4通過抑制COX6A2保護2型糖尿病胰島β細胞凋亡的作用機制;2)FXR保護高糖誘導(dǎo)的胰島β細胞凋亡的作用及機制。第一部分:Exendin-4通過抑制COX6A2保護2型糖尿病胰島β細胞我們首次發(fā)現(xiàn)COX6A2在胰島β細胞中表達,并且在2型糖尿病GK(Goto-Kajizak,GK)大鼠胰島β細胞中表達升高,體外慢性高糖培養(yǎng)促進胰島β細胞COX6A2表達。而且過表達COX6A2促進β細胞凋亡,相反,沉默COX6A2抑制高糖誘導(dǎo)的β細胞凋亡,提示COX6A2參與了糖尿病β細胞凋亡的過程。進一步研究發(fā)現(xiàn),碳水化合物反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(carbohydrate response element binding protein,ChREBP)作為一種轉(zhuǎn)錄因子,參與了β細胞COX6A2的表達調(diào)控。過表達ChREBP促進了β細胞中COX6A2的表達,而沉默ChREBP則抑制了β細胞中COX6A2的表達,說明COX6A2是ChREBP調(diào)控的靶分子。此外,我們還發(fā)現(xiàn)Exendin-4抑制高糖誘導(dǎo)的β細胞COX6A2表達,其機制可能與其抑制高糖誘導(dǎo)的ChREBP活化有關(guān)。這些結(jié)果將有助于揭示2型糖尿病胰島β細胞凋亡以及Exendin-4抑制胰島β細胞凋亡的機制。第二部分:FXR保護高糖誘導(dǎo)的胰島β細胞凋亡我們分別在β細胞上過表達和沉默F(xiàn)XR后研究FXR在慢性高糖誘導(dǎo)的β細胞凋亡中的作用。結(jié)果顯示:FXR過表達可抑制高糖誘導(dǎo)的β細胞凋亡,相反,沉默F(xiàn)XR會加劇高糖誘導(dǎo)的β細胞凋亡。提示FXR在β細胞凋亡過程中起重要作用。進一步研究發(fā)現(xiàn),過表達FXR抑制β細胞COX6A2表達,相反,沉默F(xiàn)XR促進β細胞COX6A2表達;此外,COX6A2在FXR基因敲除鼠的胰島β細胞中表達升高,提示COX6A2可能是FXR調(diào)控的靶分子。這些結(jié)果說明,FXR可能通過調(diào)節(jié)COX6A2表達從而調(diào)控β細胞凋亡。本研究為探討FXR抗β細胞凋亡作用及機制提供了科學(xué)依據(jù)。
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COX6A2 在 Exendin-4 抗 2 型糖尿病胰島β細胞凋亡中的作用及機制研究第四章 實驗結(jié)果分：Exendin-4 通過抑制 COX6A2 保護 2 型糖尿病胰島β型糖尿病條件下β細胞發(fā)生凋亡且 COX6A2 表達升高報道將 INS-1E 細胞[4]和小鼠胰島[6]長期慢性高糖培養(yǎng)不僅抑制胰島也會降低胰島素含量[22]，誘發(fā)β細胞凋亡[23,24]。我們在 INS-1E 細胞型糖尿病大鼠的胰島上檢測 Cleaved-caspase 3（圖 4.1A、圖 4.1B），，件下，β細胞確實發(fā)生了凋亡。

27A2 的 mRNA 和蛋白升高。（A）-PCR 方法檢測 COX6A2 的 mRN糖尿病大鼠 GK 分別挑取胰島，壁之后分別換 G5.5/G30 培養(yǎng)液培參。膜電位導(dǎo)致細胞色素c釋放β細胞中的功能，我們構(gòu)建了
【學(xué)位授予單位】：深圳大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R587.1

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 Kohzo Takebayashi;Yoshimasa Aso;Toshihiko Inukai;;Role of bile acid sequestrants in the treatment of type 2 diabetes[J];World Journal of Diabetes;2010年05期

本文編號：2629286