干細胞能定向誘導分化為機體幾乎所有組織中具有特定功能的終末細胞，進而修復或替代因外傷或疾病而喪失功能的組織或細胞是該領域研究的重大突破，但其準確的調(diào)控機制遠未解決。本實驗擬以人毛囊源性間充質(zhì)干細胞（hHF-MSCs）為起始細胞，在將其誘導分化為平滑肌細胞（SMCs）的研究中，聚焦于miRNA在這一分化過程中所起的作用，并試圖在miRNA的靶基因上尋找突破。材料取自引產(chǎn)胎兒的頭皮，分離出hHF-MSCs，在對其干性及多向分化潛能做出鑒定之后，以5ng/ul TGF-β1誘導hHF-MSCs分化為SMCs，用免疫熒光、流式細胞術、Western blot、RT-PCR及qRT-PCR檢測誘導后的SMCs特異性標記物表達；通過免疫熒光、qRT-PCR檢測TGF-β1誘導miR-18b作用之后的hHF-MSCs向SMC分化特異性標記物的表達；通過雙熒光素酶報告基因檢測系統(tǒng)證實miR-18b在這一過程中的靶點。結果顯示：1.多潛能性hHF-MSCs在TGF-β1誘導下分化為SMCs，mRNA和蛋白水平上表達α-SMA、calponin；2.在TGF-β1誘導hHF-MSCs向SMCs分化過程中，... 

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【部分圖文】：

胚胎干細胞分化和發(fā)育示意圖

圖 2 人成體干細胞群來源部位[19]囊干細胞毛囊（hair follicle，HF）是皮膚的重要的附屬器之一[25]，具有三個特征明時期，生長期(anagen) 、退行期（catagen）和靜止期（telogen）。早在 19，Chase[26]就提出 HF 上部的外毛根鞘囊存在的細胞群不僅能再生 HF 而且還成皮脂腺和毛囊間表皮。毛囊內(nèi)有幾種類型的干細胞包括表皮干細胞、間充干細胞[27]、黑素細胞干細胞[28]以及 nestin 陽性干細胞[29-30]，這些細胞群在毛的分布不同但彼此之間有重疊[19]。毛囊干細胞具有未分化性、自我更新和體殖能力強和慢周期性等成體干細胞的共性。囊間充質(zhì)干細胞Jahoda[31]第一次證明 HF-MSCs 位于皮質(zhì)單位（結締組織鞘和真皮乳頭）處理上，HFMSCs 在傷口愈合過程中對表皮的修復可能起作用，這類似于表皮中毛囊表皮干細胞的作用。Hoogduijn 等[19]體外比較了小鼠 BM-MSCs 和

圖 3. miRNA 生成和功能[92-93]mRNA 在 RNAPol II 作用下轉錄為 pri-miRNA，通過 Drosha 切割形成 pre-miRNA，被運輸?shù)郊毎麧{進一步被 Dicer 切割形成成熟的 miRNA，再與 mRISC 結合，導致 mRNA 降解或抑制蛋白翻譯。microRNAs (miRNAs)在干細胞中的特異性表達、功能的研究，揭示了miRNAs 已經(jīng)成為基因表達的關鍵性調(diào)節(jié)因子，調(diào)控所有的生物學過程，包括ESCs、iPSCs 和成體組織干細胞的自我更新和種系特化，以及疾病如癌癥[96-100]。在各種類型的干細胞中 miRNA 的不同表達模式和他們的調(diào)節(jié)作用對于臨床診斷和治療具有潛在性的作用[101]。3.3 miRNAs 和 ESCsESCs的兩個重要特性——多潛能性和自我更新的維持受到一系列復雜的分子通路的嚴格調(diào)控，這包括染色質(zhì)調(diào)節(jié)物、轉錄因子和ncRNAs如miRNAs[102]。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Different roles of TGF-β in the multi-lineage differentiation of stem cells[J]. Ming-Ke Wang,Fan Jiang,Zhong-Min Zou,Department of Chemical Defense and Toxicology,College of Preventive Medicine,Third Military Medical University,Chongqing 400038,China Ming-Ke Wang,Health Department of Unit 92371 of People’s Liberation Army,Fuding 355205,Fujian Province,China Ming-Ke Wang,Naval Medical Research Institute,Shanghai 200433,China Hui-Qin Sun,Yong-Ping Su,Institute of Combined Injury,State Key Laboratory of Trauma,Burns and Combined Injury,College of Preventive Medicine,Third Military Medical University,Chongqing 400038,China Ying-Chun Xiang,Department of nephrology,Xinqiao Hospital,Chongqing 400037,China.  World Journal of Stem Cells. 2012(05)
[2]胚胎干細胞來源的擬胚體分化早期血管平滑肌標志物的表達時相[J]. 韓雅玲,肖艷平,齊巖梅,康建,閆承慧.  中國應用生理學雜志. 2008(04)



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