目的:研究組成黃原膠的單糖組分對細胞因子誘導殺傷細胞(CIK)體外擴增的影響。方法:采用正交實驗確定最優的單糖組合和添加劑量,并在無血清培養體系中采用細胞培養袋靜態培養驗證所獲得的最優單糖組合對CIK細胞體外擴增的影響。采用流式細胞術檢測培養物中各類效應細胞的比例以及效應細胞中表達顆粒酶B和穿孔素的細胞比例;采用CCK-8法檢測CIK細胞對K562細胞的殺傷活性。結果:采用添加2.20 mmol/L甘露糖和0.10 mmol/L葡萄糖醛酸的無血清培養基培養單個核細胞時,第14天的總細胞擴增倍數為29.38±5.20,顯著高于對照組的18.36±4.03(P<0.05),且效應細胞CD3⁺、CD3⁺CD56⁺、CD3⁺CD8⁺細胞的擴增倍數以及CIK細胞中表達顆粒酶B和穿孔素的細胞比例均顯著增加(P<0.05),同時擴增后CIK細胞對K562細胞的殺傷活性從(17.93±2.65)%增至(29.03±4.34)%(P<0.05)。結論:甘露糖和葡萄糖醛酸的組合應...

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圖1三因子四水平正交實驗的均值主效應圖(n=3)Fig．1Maineffectmapofmeanofthree-factorfour-level

軟件選取L16(45)安排實驗，不考慮交互作用，總共設計16個正交實驗組，每組實驗重復3次。對16組實驗數據分別進行直觀分析，結果如表2和圖1所示。首先將表2中3次實驗中第14天的總細胞擴增倍數X1～X3求和得到Y值，進一步求出各因子對應于不同水平的Y值的平均值，即K1～K4，從....

圖2三因子三水平正交實驗的均值主效應圖(n=3)Fig．2Maineffectmapofmeanofthree-factorthree-level

養14d后的總細胞擴增倍數的直觀分析Tab．5Visualanalysisofexpansionfoldoftotalcellsfor14dcellcultureinthree-factorthree-levelorthog-onaltestGroupsABCExpansionf....

圖3甘露糖和葡萄糖醛酸組合應用對總細胞擴增的影響Fig．3Effectofcombinedapplicationofmannoseandglu-

ectmapofmeanofthree-factorthree-levelorthogonaltest(n=3)無血清培養基作為空白對照組，將新鮮分離的PBMCs以1×106cells/ml的細胞密度接種于裝有20ml添加甘露糖和葡萄糖醛酸的無血清培養基的T75方瓶中，并按1.2....

圖4甘露糖和葡萄糖醛酸組合應用對各類效應細胞擴增倍數的影響(n=3)

圖4甘露糖和葡萄糖醛酸組合應用對各類效應細胞擴增倍數的影響(n=3)Fig．4Effectofcombinedapplicationofmannoseandglu-curonicacidonexpansionfoldofeffectorcells(n=3)Note:Compare....

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