目的初步探討FAM134B介導(dǎo)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)自噬在膿毒癥中作用。方法采用盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)(CLP)復(fù)制膿毒癥大鼠模型,取腦組織后,q RT-PCR檢測(cè)m RNA水平、Western blotting檢測(cè)FAM134B蛋白表達(dá)量;在脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的N2a膿毒癥細(xì)胞模型中,免疫熒光檢測(cè)FAM134B在細(xì)胞中的分布,Western blotting檢測(cè)自噬相關(guān)蛋白LC3,Beclin1及凋亡相關(guān)蛋白活化Caspase-3的表達(dá);Annexin V-FITC/PI雙染流式細(xì)胞儀分析檢測(cè)細(xì)胞在不同處理后凋亡率;過表達(dá)FAM134B細(xì)胞中,LPS處理后分別檢測(cè)自噬及凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)及細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果與正常對(duì)照組比較,膿毒癥大鼠腦組織中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白FAM134B表達(dá)下降(P <0.05);LPS誘導(dǎo)膿毒癥細(xì)胞模型中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)自噬及細(xì)胞凋亡,且過表達(dá)FAM134B能減少LPS對(duì)細(xì)胞的損害(P <0.05)。結(jié)論 FAM134B介導(dǎo)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)自噬影響膿毒癥的發(fā)生。

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 膿毒癥大鼠模型的復(fù)制
        1.2.2 膿毒癥大鼠模型中腦部組織總RNA及總蛋白的提取
        1.2.3 實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR)檢測(cè)FAM134B mRNA的表達(dá)
        1.2.4 N2a細(xì)胞培養(yǎng)及處理
        1.2.5 Western blotting檢測(cè)FAM134B、LC3、Beclin1及Caspase-3蛋白相對(duì)表達(dá)
        1.2.6免疫熒光檢測(cè)FAM134B亞細(xì)胞分布
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 膿毒癥大鼠腦組織中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白FAM134B的表達(dá)情況
    2.2 LPS誘導(dǎo)膿毒癥細(xì)胞模型中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)自噬及細(xì)胞凋亡
    2.3 過表達(dá)FAM134B對(duì)自噬及凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
3 討論



本文編號(hào)：4050803