本文來自《中國生物工程雜志》的技術論文，主要是關于不同難度閱讀理解測試學生元認知策略運用狀況的相關研究，詳情請看下面的介紹。

　　鹿銜草為鹿蹄草科植物鹿蹄草(PyrolacallithaH．Andres)或普通鹿蹄草(PyroladecorateH．Andres)的干燥全草，鹿銜草具有增加機體免疫力、擴張血管、促進冠脈循環、降壓、調脂等作用，對于治療心腦血管疾病療效確切，有很好的開發利用前景。目前已經分離鑒定出金絲桃苷、高熊果酚苷、鹿蹄草素、腎葉鹿蹄草苷、羥基腎葉鹿蹄草苷、沒食子酰基高熊果酚苷、2一O一沒食子�；鸾z桃苷、沒食子酸、兒茶素等多種黃酮和多酚類成分，現代藥理學研究表明，這些黃酮和多酚類化合物是治療心腦血管疾病的主要有效成分。因此，本試驗以總黃酮和總多酚含量為考察指標，采用正交試驗優選最佳提取工藝，為鹿銜草的開發利用和生產實際提供理論依據。

　　1儀器與試藥

　　1．1儀器752型紫外分光光度計(上海精密科學儀器有限公司)；760CRT雙光束紫外一可見分光光度計(北京普析通用儀器有限公司)；BP一121S電子天平(天津儀器廠)；RE-52AA型旋轉蒸發儀(上海亞榮儀器廠)。

　　1．2試藥鹿銜草：購自山西萬榮縣，經山西醫科大學藥學院生藥教研室白云娥副教授鑒定為鹿蹄草科植物普通鹿蹄草(PyroladecorateH．Andres)的干燥全草；蘆丁對照品(中國藥品生物制品鑒定所，10081—9906)；沒食子酸對照品(中國藥品生物制品鑒定所，0831-9501)；三氯化鋁、醋酸鉀、醋酸鈉、醋酸、碳酸鈉、鎢酸鈉、磷酸等試劑均為分析純。

　　2方法與結果

　　2．1總黃酮的含量測定

　　2．1．1溶液的制備：(1)對照品溶液的制備：精密稱取干燥至恒重的蘆丁標準品11．0mg，置于25mI量瓶中，加50乙醇適量使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，即得(每mI含蘆丁440g)。(2)供試品溶液制備：精密稱取藥材提取物50mg，精密稱定，置25mI量瓶中，加50乙醇適量，超聲30rain，放冷用50乙醇適量稀釋至刻度，搖勻，過濾，取續濾液作為供試品溶液。

　　2．1．2測定波長的選擇：分別精密量取蘆丁對照品溶液、供試品溶液適量，置于10mI量瓶中，加0．1mol／l的醋酸鉀溶液3ml，0．1mol／l的三氯化鋁溶液2mI，顯色20min，加5O乙醇稀釋至刻度。以50的乙醇為參比，按照紫外分光光度法在300～600nm波長范圍內掃描，對照品和供試品在410nm均有最大吸收，故確定410nm為測定波長。

　　2．1．3線性關系考察：精密量取對照品溶液0．1ml。0．2ml。0．3ml，0．4ml，0．5mI，0．6mI，置于10mI量瓶中，加0．1mot／l的醋酸鉀溶液3mI，0．1mol／I的三氯化鋁2mI，顯色20rain，加5O乙醇稀釋至刻度，搖勻，同時作空白。照分光光度法在410nm的波長處測定吸收度，以吸收度(A)為縱坐標，濃度(C)為橫坐標，繪制標準曲線，得到回歸方程：A一0．0331C+0．0305(r=0．9999)，結果表明，蘆丁在4．4～26．4／zg／mI范圍內，線性良好。

　　2．1．4樣品含量測定：取供試品溶液1mI，置于10mI量瓶中，按2．1．3項下顯色方法顯色2Omin，加5O乙醇稀釋至刻度，搖勻，測定A，按標準曲線計算總黃酮含量，總黃酮以蘆丁。

　　2．2總多酚的含量測定

　　2．2．1溶液的制備：(1)Folin試液的配制：稱取10g鎢酸鈉置于圓底燒瓶中，用75mI的蒸餾水溶解，加入85磷酸8mI，回流3h，冷卻移入100mI量瓶中用蒸餾水定容。(2)對照品溶液的制備：精密稱取沒食子酸對照品10．8mg，置于100mI棕色量瓶中，加入30甲醇稀釋至刻度，筆耕論文新浪博客，搖勻，即得(每mI含沒食子酸108g)。(3)供試品溶液制備：精密稱取藥材提取物0．3g，精密稱定，置25mI量瓶中，加5O乙醇適量，超聲30rain，放冷用5O9／6乙醇適量稀釋至刻度，搖勻，過濾，取續濾液作為供試品溶液。

　　2．2．2測定波長的選擇：精密量取沒食子酸對照品溶液、供試品溶液適量，分別置于10mI量瓶中，用0．1mol／I醋酸鈉一醋酸緩沖液定容，搖勻，分別取1mL于10mI量瓶中，加Folin試液0．5mL，用2碳酸鈉溶液定容，放置30rain顯色。按照紫外分光光度法在400～900nm波長范圍內掃描，結果顯示，顯色后對照品和供試品在730nm均有最大吸收，故選擇730nm為測定波長。

　　2．2．3線性關系考察：分別吸取對照品溶液1．0ml，2．0ml，3．0mI，4．0mI，5．0mI，6．0ml，置于10mI量瓶中，用0．1mol／l醋酸鈉一醋酸緩沖液定容，搖勻，分別取1mI于10mI量瓶中，按2．2．2方法顯色后放置30rain，避光保存，在730nm處測定吸光度，以吸收度(A)為縱坐標，沒食子酸濃度(C)為橫坐標，繪制標準曲線，得到回歸方程：A一0．1503C+0．0l11(r一0．9999)，結果表明，沒食子酸在1．08～6．48~g／mI范圍內，線性關系良好。

　　2．2．4樣品含量測定：取供試品溶液1mI，置于10mI量瓶中，用0．1mol／I醋酸鈉一醋酸緩沖液定容，搖勻，取1mI于10mI量瓶中，按2．2．2項下顯色后避光放置30rain，測定A，按標準曲線計算總多酚含量，總多酚以沒食子酸計。

　　2．3鹿銜草提取方法考察稱取5g過2O目篩的鹿銜草干燥粗粉五份，精密稱定分別按下列方法提取。

　　乙醇回流提取法：加入50乙醇100mI，回流提取2h，提取液過濾，將濾液減壓濃縮，真空干燥制成干燥浸膏，精密稱定干膏重量，備用。水回流提取法：加入水100mI，回流提取2h，提取液過濾，將濾液減壓濃縮，真空干燥制成干燥浸膏，精密稱定干膏重量，備用。

　　滲漉提取法：50mI50乙醇裝筒浸漬48h，加100mI5O乙醇，以2mI／rain速度滲漉，收集滲漉液，減壓濃縮，真空干燥制成干燥浸膏，精密稱定干膏重量，備用。索氏提取法：加100mI50乙醇，索氏提取2h，提取2次，合并提取液，減壓濃縮，真空干燥制成干燥浸膏，精密稱定干膏重量，備用。

　　乙醇超聲提取法：加入50乙醇100mL，超聲提取30min，提取液過濾，將濾液減壓濃縮，真空干燥制成干燥浸膏，精密稱定干膏重量，作為提取物備用。將上述5種方法所得的提取物制備供試品溶液，采用分光光度法測定提取物中總黃酮和總多酚的含量，并計算5種提取方法的提取率及浸膏中的含量，結果見表1。結果表明采用乙醇回流提取法，兩類有效成分的提取率及浸膏中含量均較高，故確定選用乙醇回流提取法為最佳提取方法。

　　2．4正交試驗設計在預實驗基礎上，確定采用乙醇回流提取，對乙醇濃度、提取時間、提取次數和料液比4個因素，以鹿銜草總黃酮、總多酚提取率為考察指標進行L。(3)正交實驗。