本文選題：PTTG1　切入點：結直腸癌　出處：《福建醫科大學》2016年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：【目的】亞磷酸鹽測序法(BSP)檢測40例散發型性結直腸癌患者腫瘤組織及瘤旁相對正常的腸粘膜組織PTTG1基因啟動子區Cp G島甲基化率,蛋白質印跡法(Western Blot)及實時熒光定量PCR(q RT-PCR)檢測PTTG1基因的表達情況,并進一步研究其與病理及臨床特征之間的關系。【方法】40例散發性結直腸癌患者癌組織及癌旁相對正常的腸粘膜組織:亞磷酸鹽測序法檢測PTTG1基因啟動子區Cp G島(-1~-400bp區域)的甲基化率;蛋白質印記法(WB)和實時熒光定量PCR(q RT-PCR)技術分別檢測PTTG1蛋白和m RNA在癌組織及癌旁組織表達;分析其PTTG1基因的表達與病理學特征及臨床關系。【結果】1.亞硫酸鹽測序法(BSP)檢測40例結直腸癌患者的癌組織及癌旁相對正常腸粘膜組織PTTG1基因啟動子Cp G島(-1~-400bp區域)范圍內共有32個可甲基化位點。其中腫瘤組織組甲基化率19.05±4.45,癌旁組為68.07±3.71,差異有統計意(P=0.032,P0.05)。結直腸癌組織PTTG1基因啟動子區Cp G島的甲基化率低于癌旁組織,癌組織的甲基化率與腫瘤分化程度、浸潤深度相關,與淋巴結轉移、年齡、性別等因素無關;2.免疫印記實驗法(WB)檢測40例結直腸癌患者的癌組織及癌旁相對正常腸粘膜組織中PTTG1蛋白表達量分別為2.79±0.23和1.00±0.17,差異有統計學意義(P0.05)。直腸癌癌組織PTTG1蛋白高表達與癌旁組織,PTTG1蛋白在直腸癌組織的高表達與腫瘤的浸潤深度、分化程度相關,與患者的年齡、性別以及腫瘤大小和淋巴轉移等無關;3.實時熒光定量PCR(q RT-PCR)檢測40例結直腸癌患者的癌組織及癌旁相對正常腸粘膜組織中PTTG1 m RNA表達量的2-ΔΔCT值分別為18.38±2.14和9.37±1.49,差異有統計學意義(P=0.028,P0.05),顯示結直腸癌組織中PTTG1 m RNA表達水平較癌旁組織升高。【結論】1.PTTG1啟動子區內Cp G島(-1~-400bp區域)癌組織的甲基化率低于癌旁組織;2.PTTG1基因在散發性結直腸癌組織中高表達,其與分化程度、浸潤深度相關。可能為結直腸癌發病機制、診斷、治療、預防提供新的思路。
[Abstract]:[objective] to detect the methylation rate of CpG island in the promoter region of PTTG1 gene in 40 patients with sporadic colorectal cancer and adjacent normal intestinal mucosa by phosphite sequencing. Western blotting and real-time fluorescence quantitative PCR(q RT-PCR were used to detect the expression of PTTG1 gene. [methods] 40 patients with sporadic colorectal cancer and adjacent normal intestinal mucosa were examined by phosphite sequencing for the detection of CP G islands in the promoter region of PTTG1 gene. [methods] the relationship between the pathological and clinical features was further studied. [methods] 40 patients with sporadic colorectal cancer were examined for CpG islands in the promoter region of the PTTG1 gene by phosphite sequencing. The methylation rate of the region was 400 BP. Protein imprinting and real-time quantitative PCR(q RT-PCR were used to detect the expression of PTTG1 protein and m RNA in cancer tissues and adjacent tissues, respectively. To analyze the expression of PTTG1 gene and its clinicopathological characteristics. [results] 1. The PTTG1 gene promoter of PTTG1 gene in 40 patients with colorectal cancer and adjacent normal intestinal mucosa was detected by sulfite sequencing. The methylation rate in tumor tissue group was 19.05 鹵4.45, and that in paracancerous group was 68.07 鹵3.71, the difference was statistically significant. The methylation rate in PTTG1 promoter region of colorectal cancer was lower than that in paracancerous tissue. The methylation rate of cancer tissue was related to the degree of differentiation, depth of invasion, lymph node metastasis, age, The expression of PTTG1 protein was 2.79 鹵0.23 and 1.00 鹵0.17 in 40 patients with colorectal cancer and relative normal intestinal mucosa, respectively, and the difference was statistically significant (P 0.05). The high expression of PTTG1 protein and the high expression of PTT G1 protein in the adjacent tissues of rectal cancer and the depth of tumor invasion. The degree of differentiation is related to the age of the patient, Sex, tumor size and lymphatic metastasis. Real-time quantitative PCR(q RT-PCR was used to detect the expression of PTTG1 m RNA in cancer tissues and adjacent normal intestinal mucosa of 40 patients with colorectal cancer. The values of 2- 螖 螖 CT were 18.38 鹵2.14 and 9.37 鹵1.49, respectively. The expression of PTTG1 m RNA in colorectal cancer tissues was significantly higher than that in adjacent tissues. [conclusion] 1. The methylation rate of PTT G1 promoter was lower than that of adjacent tissues. 2. PTTG1 gene was highly expressed in sporadic colorectal cancer tissues. It may provide new ideas for the pathogenesis, diagnosis, treatment and prevention of colorectal cancer.
【學位授予單位】：福建醫科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R735.34

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本文編號：1561304