多粘類芽孢桿菌（Paenibacillus polymyxa）是一類功能良好的植物根際促生細菌（PGPR）,因其在農業上的生防作用越來越受到人們關注。本實驗室篩選得到一株多粘類芽孢桿菌SC2,胞外多糖生產能力強,有很強的植物病原菌抗性,多粘類芽孢桿菌SC2的全基因組已完成測序,其分子生物學信息較豐富。SC2可產生多糖等胞外分泌物,不利于分子操作,而其自然突變株SC2-M1相對容易操作,可作為分子生物學遺傳操作表達體系工具菌株。構建可在SC2-M1中穩定表達外源基因的載體,為研究SC2提供可行的分子生物學手段。本研究利用木糖異構酶和gfp基因在SC2-M1中超表達,驗證構建載體在SC2-M1中的活性。pHY300PLK質粒上不含啟動子和信號肽基因,常被用作啟動子、信號肽等元件的表達載體,是常用的大腸桿菌（Escherichia coli）-枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）的穿梭質粒。通過在多粘類芽孢桿菌SC2-M1中轉化質粒pGFP4412,確定pGFP4412上的gfp基因可在多粘類芽孢桿菌SC2-M1中穩定表達。從pGFP4412上擴增的gfp全基因表達框插入到質粒... 

【文章來源】：山東農業大學山東省

【文章頁數】：74 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

多粘菌素的結構示意圖

圖 1-1 多粘菌素的結構示意圖Fig. 1-1 Polymyxin structureusaricidins）是一種與多粘菌素相似的環狀、D 四種分子量在 800-900Da 之間抗菌多肽（殺鐮孢菌素對尖孢鐮刀菌（Raza et al., 2009珠菌（Kajimura et al., 1997）、釀酒酵母菌等泛應用于防治植物病害，尤其是在防治黃瓜枯8），在農業的應用上前景廣闊。殺鐮孢菌素（五烷酸和 6 個氨基酸殘基組成，在肽鏈上有 2、X3，圖 1-2 為殺鐮孢菌素結構圖。編碼殺，從已完成測序的多粘類芽孢桿菌 E681、SC成殺鐮孢菌素的過程中起著重要的作用（Ch

多粘類芽孢桿菌 SC2 的基因表達體系優化不同，這些微生物的木糖代謝途徑也不盡相同。如圖 1-3 所示途徑。這兩種代謝途徑分別為：（1）在酵母等真菌中普遍存氫酶途徑（簡稱 XR-XDH 途徑）；（2）在大腸桿菌和芽孢桿遍存在的另外一條途徑—木糖異構酶（xylose isomerase, XI）R-XDH 途徑是指在依賴 NADPH 的木糖還原酶（xylose reduc還原為木糖醇，隨后在利用 NAD+的木糖醇脫氫酶（xylitol de被氧化為木酮糖，再經木酮糖激酶（xylulokinase, XK）的磷酸后進入非氧化磷酸戊糖途徑（pentose phosphate pathway, PPP）-磷酸甘油醛的形式進入糖酵解途徑（Glycolysis），在無氧條糖通過木糖異構酶（xylose isomerase, XI）一步轉化為木酮糖磷酸戊糖途徑，最終被轉化為乙醇。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]多粘類芽孢桿菌研究進展[J]. 田宇曦,閔勇,楊自文,王開梅.  湖北農業科學. 2017(18)
[2]枯草芽孢桿菌表達系統及其啟動子研究進展[J]. 余小霞,田健,劉曉青,伍寧豐.  生物技術通報. 2015(02)
[3]多粘類芽孢桿菌生物特性及其機理研究進展[J]. 王劉慶,王秋影,廖美德.  中國農學通報. 2013(11)
[4]多粘類芽孢桿菌的研究進展[J]. 蒼桂璐,張付云,楊陽,王斌,何云海.  安徽農業科學. 2013(02)
[5]多粘類芽孢桿菌20185液態發酵產堿性果膠酶發酵條件的研究[J]. 蔣紅菊,許威震,朱春林,孫東平.  中國釀造. 2011(10)
[6]多粘類芽孢桿菌CP7β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因的克隆、表達及應用[J]. 文鳳云,廖富蘋,林健榮,鐘楊生.  中國農業科學. 2010(22)
[7]GFP標記的多粘芽孢桿菌1114在番茄根際的定殖[J]. 彭祎,譚悠久,黃永春.  中國生物防治. 2010(03)
[8]土壤有益細菌在植物根際競爭定殖的影響因素[J]. 年洪娟,陳麗梅.  生態學雜志. 2010(06)
[9]多粘類芽孢桿菌在黃瓜葉面和土壤中定殖能力及其對土壤微生物的影響[J]. 趙新海,鐘麗娟,張慶華,徐沖.  世界農藥. 2009(05)
[10]綠色熒光蛋白——發現、表達和發展[J]. Mns Ehrenberg,羅文新,夏寧邵.  生物物理學報. 2008(06)

博士論文
[1]GhEF1A8啟動子克隆與功能分析及抗草甘膦轉基因棉花研究[D]. 孫豹.中國農業科學院 2014
[2]芽孢桿菌染色體編輯系統構建及三種抗真菌物質合成的遺傳調控研究[D]. 汪洋.南京農業大學 2012
[3]生防多粘芽孢桿菌SQR-21的定殖與誘導植物系統抗性研究[D]. 張振華.南京農業大學 2011
[4]枯草桿菌基因一步敲除法的建立和MPH在芽孢桿菌中表達的研究[D]. 閆新.南京農業大學 2008
[5]枯草桿菌新型表達系統和遺傳操作體系的建立及應用[D]. 張曉舟.南京農業大學 2006

碩士論文
[1]枯草芽孢桿菌Tpb55菌株對黑脛病的防治效果、根際定殖規律及微生態效應[D]. 韓騰.中國農業科學院 2016
[2]多粘類芽孢桿菌SC2的全基因組測序[D]. 王翠翠.山東農業大學 2011
[3]枯草芽孢桿菌B2發酵工藝初探及其田間定殖和促生防病效果研究[D]. 李美麗.甘肅農業大學 2008



本文編號：2896985