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HRM技術(shù)在檢測(cè)冠心病患者脂代謝相關(guān)基因中的應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2025-06-26 02:48
  目的:分析ApoE基因多態(tài)性與冠心病患者冠脈病變程度及血脂水平的關(guān)系。方法:選取2017年6月至2018年9月于沈陽(yáng)軍區(qū)總醫(yī)院住院并首次行冠脈造影確診為冠心病的患者179例(心絞痛90例,心梗89例);經(jīng)冠脈造影或冠脈CT造影為陰性的30例患者作為對(duì)照組。采納患者均排除嚴(yán)重肝腎功能障礙,甲狀腺疾病,惡性腫瘤,家族性高脂血癥等,采用PCR-HRM方法測(cè)定患者ApoE基因型,血脂水平按常規(guī)方法檢測(cè),同時(shí)記錄患者年齡,高血壓病史,吸煙史,飲酒史,腦血管病史等臨床資料及總膽固醇,甘油三酯,高密度脂蛋白,低密度脂蛋白,同型半胱氨酸等檢驗(yàn)指標(biāo),記錄患者冠脈狹窄支數(shù),并用Gensini評(píng)分法評(píng)估冠脈病變的嚴(yán)重程度。對(duì)比心絞痛組(90例)和急性心梗組(89例)間ApoE基因型及ε2,ε3,ε4三個(gè)等位基因頻率,比較基因多態(tài)性與心梗之間的關(guān)系;對(duì)比三個(gè)等位基因與冠脈病變支數(shù)和Gensini分值,進(jìn)一步分析ApoE基因型與冠脈病變支數(shù)及冠脈病變程度的相關(guān)性。結(jié)果:1、179例冠心病患者共發(fā)現(xiàn)6種基因型(ε3/ε3,ε3/ε4,ε2/ε3,ε2/s4,ε2/ε2,ε4/ε4)和三種等位基因(ε2,ε3,ε4)...

【文章頁(yè)數(shù)】:53 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖2:不同DNA濃度下的PCR擴(kuò)增曲線:棕300ng/|?iL,黃lOOng/^L,紫30ng/(nL,紅??10ng/(iL,灰?100pg/|iL,綠?lpg/|aL??

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與rs7412兩個(gè)位點(diǎn)PCR產(chǎn)物電泳圖;最左側(cè)為DNA?Marker,??前丨1泳道擴(kuò)增產(chǎn)物片段大小為89?bp;后11泳道擴(kuò)增產(chǎn)物大小片段為70?bp。??3.2?HRM反應(yīng)體系的建立??1)不同DNA模板濃度??調(diào)制?300?ng/(iL,100?ng/|iL,30?ng/|....


圖4:不同引物濃度下的PCR擴(kuò)增曲線:從左向右:紅1.2?nL,青1.6?|iL,紫:2.0?nL,??灰?2.4(iL,黃色?2.8pL??

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3?25?27?29?31?33?35?37?}9?<1?i3??Cfcies??圖3:不同引物濃度下的PCR擴(kuò)增曲線:從左向右:綠0.2?nL,紅0.4?pL,藍(lán):0.6?nL,??黃色?0.8?pL,紅?1.0?nL??3)不同Mgcl2濃度??加入?l.2|aL,1.6pL....


圖3:不同引物濃度下的PCR擴(kuò)增曲線:從左向右:綠0.2?nL,紅0.4?pL,藍(lán):0.6?nL,??黃色?0.8?pL,紅?1.0?nL??

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大連醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文??足,檢測(cè)不同引物濃度下的PCR擴(kuò)增曲線,如圖3所示。綜合來(lái)看,引物體積在??0.2pL時(shí),PCR擴(kuò)增曲線最好。??Fhiortfcoce?History??T1削??5?幽!?〇?6ni?????s,am??;,3〇}?〇_awi???^-4yf??;....


圖5:?rs7412各個(gè)基因型Tm值??

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大連醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文??87.90°C。野生型和雜合型Tm值差異較大,可通過(guò)Tm區(qū)分雜合型和純合型,但??是野生純合型和突變純合型間雖然Tm值差異較小,但是其可通過(guò)熔解曲線區(qū)分??開(kāi)來(lái),如圖5-圖7所示。??2?Meltiti;??_???.?.?.?.??S騰?土??s歷?....



本文編號(hào):4053031

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