錦鯉皰疹病毒病（KHVD）由錦鯉皰疹病毒3型（CyHV-3）引起,隨著該病在全球鯉養殖產區的連續爆發,給鯉的規模化養殖帶來巨大經濟損失,因此研究鯉對CyHV-3防御機制對防治該病具有重要意義。對鏡鯉抗錦鯉皰疹病毒（CyHV-3）新品種的選育工作,目前已進行到F3代。本研究利用實時熒光定量PCR技術及免疫指標檢測試劑盒技術研究三個選育世代的CyHV-3病毒載量、免疫相關基因（TRAF6、MyD88a、IL-1β、TLR7a、I-IFN）的表達、磷酸酶活性（AKP、ACP）、抗氧化能力（GSH、SOD、T-AOC）、特異性免疫相關指標（IgM）及非特異免疫相關指標（LZM、C3、C4）的變化規律,對鏡鯉抗病選育世代進行抗病力評估。研究結果如下:CyHV-3病毒載量比較:病毒感染時,三個選育世代的脾中CyHV-3病毒載量均顯著高于腎（P<0.05）,說明CyHV-3可能主要侵染鯉的脾組織。三個選育世代間,CyHV-3病毒載量在脾和腎中呈下降趨勢,其中F3脾、腎中病毒載量顯著低于F₁、F₂（P<0.05）,推測選育世代間抗病力具有逐代增強的...

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【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
引言
第一章 文獻綜述
    1.1 魚類固有免疫應答
        1.1.1 防御屏障的作用
        1.1.2 固有免疫應答的識別機制
        1.1.3 固有免疫的效應細胞
        1.1.4 固有有免疫的效應分子
    1.2 魚類適應性免疫應答
        1.2.1 淋巴細胞抗原識別、提呈及激活
        1.2.2 適應性免疫應答的效應機制
    1.3 本研究的目的及意義
第二章 鯉CyHV-3病毒載量比較及選育世代抗病力評估
    2.1 材料和方法
        2.1.1 實驗設計
        2.1.2 實驗魚及樣品采集
        2.1.3 主要試劑及儀器
        2.1.4 基因組DNA提取
        2.1.5 CyHV-3病毒載量的相對定量
        2.1.6 實時熒光定量PCR
        2.1.7 數據統計與分析
    2.2 結果與分析
        2.2.1 基因組DNA提取
        2.2.2 選育世代間CyHV-3病毒載量情況比較
        2.2.3 脾、腎中CyHV-3病毒載量情況比較
    2.3 討論
第三章 鯉免疫基因的差異表達及選育世代抗病力評估
    3.1 材料和方法
        3.1.1 實驗設計
        3.1.2 實驗用魚及樣品采集
        3.1.3 實驗試劑及儀器
        3.1.4 總RNA提取
        3.1.5 未感染組感染CyHV-3檢測
        3.1.6 實時熒光定量PCR
        3.1.7 數據統計與分析
    3.2 結果與分析
        3.2.1 基因組DNA、總RNA提取、cDNA合成
        3.2.2 夏花組CyHV-3 檢測結果
        3.2.3 未感染組F₁、F₂、F₃中免疫基因的表達
        3.2.4 感染組F₁、F₂、F₃中免疫基因的表達
        3.2.5 感染組脾、腎組織免疫基因表達
    3.3 討論
        3.3.1 免疫基因表達分析
        3.3.2 抗病力評估
第四章 組織中免疫相關指標的變化及選育世代抗病力評估
    4.1 材料和方法
        4.1.1 樣本采集與處理
        4.1.2 實驗試劑
        4.1.3 實驗儀器
        4.1.4 免疫指標檢測
        4.1.5 數據統計與分析
    4.2 結果與分析
        4.2.1 磷酸酶活性比較
        4.2.2 抗氧化能力比較
    4.3 討論
        4.3.1 魚類磷酸酶酶活分析
        4.3.2 魚類抗氧化能力分析
        4.3.3 抗病力評估
第五章 血清中免疫相關指標的變化及選育世代抗病力評估
    5.1 材料和方法
        5.1.1 實驗設計
        5.1.2 樣本采集與處理
        5.1.3 實驗試劑
        5.1.4 實驗儀器
        5.1.5 數據統計與分析
    5.2 結果與分析
        5.2.1 溶菌酶(LZM)活性比較
        5.2.2 補體C3、補體C4比較
        5.2.3 免疫球蛋白M(IgM)比較
    5.3 討論
        5.3.1 血清中非特異性免疫指標及特異性免疫指標比較分析
        5.3.2 抗病力評估
第六章 養殖對比實驗及選育世代抗病力評估
    6.1 材料和方法
        6.1.1 實驗場地選擇及養殖模式
        6.1.2 網箱規格及排布方式
        6.1.3 放養密度及養殖管理
        6.1.4 捕撈及統計
    6.2 結果與分析
    6.3 討論
結論
參考文獻
致謝
攻讀碩士論文期間發表的學術論文



本文編號：4057918