第一部分創傷性腦損傷后鐵穩態調控相關因子的表達改變目的:研究創傷性腦損傷(Trauamatic brain injury,TBI)后鐵穩態調控因子鐵調素與膜鐵轉運蛋白表達變化的時程。方法:1.實驗動物模型建立及分組:選擇成年ICR小鼠,采用改良的Feeney法建立TBI模型,隨機分為假手術組(Sham)與TBI組,TBI組中按照TBI處理后檢測時間分為3h、12h、24h、3d、5d、7d組。2.Western blot檢測:按照不同時間點,取實驗動物傷灶附近腦組織,檢測鐵調素(hepcidin)、膜鐵轉運蛋白(Ferroportin,FPN)及轉鐵蛋白受體(Transferrin receptor,TFR)1表達水平。結果:相對于Sham組,TBI后FPN隨時間增長其表達水平逐漸下降,5d時到達最低谷,7d時濃度又開始上升;鐵調素在5d內濃度逐漸上升,7d時濃度下降;TFR1在TBI后3h時濃度上升,然后隨時間增長逐漸下降。結論:TBI后鐵調素表達增加,FPN表達水平下降,TFR1早期升高后降低。第二部分HY-13066A干預鐵穩態調控因子對創傷性腦損傷后神經元損傷的影響目的:探討對...

【文章頁數】：41 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1細胞內膜鐵轉運蛋白的調控機制[39]

南京大學碩士學位論文12圖1細胞內膜鐵轉運蛋白的調控機制[39]在巨噬細胞內，BACH1和NRF2分別作為FPN轉錄的抑制劑和興奮劑[40]。有研究證明在缺鐵狀態下，miR-485-3p可在轉錄后水平抑制FPN的表達[40]。在低鐵狀態下，鐵應答元件結合蛋白（Ironregula....

圖2病灶周圍組織取材部位示意圖

南京大學碩士學位論文22右至肝臟發白、右心房流出清亮液體。斷頭取腦，剝離顱骨暴露腦組織，取傷灶附近5mm處腦組織作為標本置于凍存管中并標記，放置于-80℃冰箱中保存，該樣品可用于Westernblot檢測。圖2病灶周圍組織取材部位示意圖2.2.4.4腦組織蛋白提取及蛋白變性將上述....

圖1.TBI后小鼠腦內鐵穩態調控相關因子FPN、鐵調素及TFR1代表性Western

南京大學碩士學位論文24然后，我們測定了可與FPN結合來調節FPN膜濃度的鐵調素的表達。相對于Sham組來說，鐵調素表達逐漸上升，第5天時達到高峰，第7天時開始降低。最后，我們還測定了與細胞內鐵濃度密切相關的TFR1的表達。需要指出的是，在TBI后3hTFR1反常性增高，然后逐漸....

圖3HY-113066A治療后FPN、TFR1及鐵調素改變：代表性Westernblot結果

南京大學碩士學位論文323.3結果3.3.1阻斷FPN與鐵調素相關作用對鐵調素、FPN及TFR1的影響我們首先用Westernblot方法測定了HY-113066A治療后腦內與鐵穩態調節有關的蛋白的影響。結果發現在用藥后FPN含量相較于未給藥的TBI組，其蛋白水平明顯增高。相應的....

本文編號：3999271