韭菜遲眼蕈蚊(Bradysia odoriphaga)是危害韭菜等百合科蔬菜的一種重要害蟲,可導致韭菜大量減產。性別決定與分化是影響韭菜遲眼蕈蚊生殖、發育和種群結構的關鍵因素,doublesex(dsx)基因是控制昆蟲性別分化的關鍵基因。但迄今為止對于韭菜遲眼蕈蚊dsx還沒有相關報道。為了研究韭菜遲眼蕈蚊的性別決定基因dsx,我們基于韭菜遲眼蕈蚊轉錄組數據,比對到Bodsx相關片段,采用RT-PCR與RACE方法克隆出Bodsx基因,利用生物信息軟件對所得到的序列進行結構域預測、氨基酸序列比對和系統發育分析。采用定量PCR方法研究了dsx基因在韭菜遲眼蕈蚊不同發育時期的表達情況。采用RNAi技術初步研究了dsx基因在韭菜遲眼蕈蚊體細胞性別決定中的作用。具體結論如下:1.克隆了韭菜遲眼蕈蚊的Bodsx基因,擴增出4條序列,包括6個外顯子,其中2個剪切體分別是非性特異性剪切體。預測了韭菜遲眼蕈蚊dsx蛋白,分為雌性特異性蛋白BoDSXF和雄性特異性蛋白BoDSXM。發現BoDSX具有保守的OD1與OD2結構域,這2個結構域主要參與DNA與蛋白質的相互作用。發現了Bodsx具有雙翅目昆蟲dsx...

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1昆蟲遺傳型性別決定模式圖（Verhulstetal.,2015）

圖1昆蟲遺傳型性別決定模式圖（Verhulstetal.,2015）Fig.1Theinsectgenotypesexdeterminationpattern（Verhulstetal.,2015）Y、XX/XO和2n/1n分別代表不同染色體性別決....

圖2韭菜遲眼蕈蚊Bodsx剪切體的分子結構

Exon5（352bp）和一個Exon6（1141bp）的外顯子（圖2），分別命名為外顯子E2、E3、E4、E5和E6。其中外顯子E4沒有擴增到polyA，但是擴增到了終止密碼子TGA。初步判斷Bodsx基因由6個外顯子組成：E1、E2、E3、E4....

圖3韭菜遲眼蕈蚊Bodsx的保守結構域預測圖

3.2.2Bodsx的保守結構域預測預測了Bodsx的保守結構域，發現韭菜遲眼蕈蚊Bodsx4個剪切體都有OD1結構域，其中2個剪切體還含有OD2結構域（圖3）。通過與已報道的在dsx基因上發現的保守序列比對發現，韭菜遲眼蕈蚊Bodsx除了OD1和OD2結構域外，還有昆蟲d....

圖4韭菜遲眼蕈蚊和黑腹果蠅等DSX蛋白的多重序列比對Fig.4PeptidealignmentofD.melanogaster,An.gambiae,S.ocellarisandB.odoriphagadoublesexgenesdsx基因的蛋白序列被分為三個部分:共同區域（雌雄共同區域）；雌性特異性區域；雄性特異性區域

圖4韭菜遲眼蕈蚊和黑腹果蠅等DSX蛋白的多重序列比對Fig.4PeptidealignmentofD.melanogaster,An.gambiae,S.ocellarisandB.odoriphagadoublesexgenesdsx基因的蛋....

本文編號：4057040