目的:研究吸煙對胰島β細胞功能、胰島素分泌和肝糖原合酶表達的影響,探討褪黑素在其中的保護作用。方法:Sprague-Dawley大鼠體內實驗分為吸煙組、藥物保護組、單純藥物組和對照組,動態監測血糖變化,取材胰島和肝臟組織,分別從蛋白表達和組織病理水平研究吸煙對糖代謝相關的胰島素分泌和肝糖原合成的影響;通過分別加入上述四組大鼠血清,培養胰島β細胞和肝細胞,應用RT-PCR和蛋白印跡研究細胞分泌和合成功能的變化。結果:吸煙組大鼠的血糖和糖化血紅蛋白明顯升高;電鏡顯示胰島β細胞微結構紊亂、細胞器損傷和胰島素分泌顆粒減少;免疫組化和蛋白印跡實驗證實吸煙導致凋亡分子caspase-3在β細胞中表達明顯增加;病理分析顯示,吸煙大鼠胰島組織出現顯著的CD68炎性細胞浸潤和活性氧簇ROS過表達;蛋白及基因分析表明吸煙抑制肝糖原合酶表達,進而組織病理證實吸煙大鼠肝臟中肝糖原積累明顯降低。褪黑素保護組大鼠的血糖和糖化血紅蛋白較吸煙組明顯降低;電鏡顯示β細胞結構恢復、胰島素分泌顆粒增加;并且caspase-3表達、CD68炎性細胞浸潤和活性氧簇ROS產生均明顯降低;肝糖原合酶和肝糖原積累均明顯增加。單純藥物...

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１Ａ，吸煙組對比空白對照組：（１４．２??±０．６３）ｍｍｏｌ／Ｌｖｓ（６．８±０．６３）ｍｍｏｌ／Ｌ）

大鼠吸煙３個月后，血糖明顯升高（圖１Ａ，吸煙組對比空白對照組：（１４．２??±０．６３）ｍｍｏｌ／Ｌｖｓ（６．８±０．６３）ｍｍｏｌ／Ｌ）。此外，糖化血紅蛋白在吸煙大鼠體內也明??顯升高（圖１Ｂ，吸煙組對比空白對照組：（１６．２±１．４）％ｖｓ（８．３±０．９）％），上述結??果....

圖２：電鏡觀察ｐ細胞超微結構和分泌顆粒（白箭頭）

電鏡圖片顯示正常對照組大鼠的Ｅ５細胞具有清晰的細胞結構，其胞內細??胞核、線粒體、內質網等細胞器清晰可見并且排列整齊，細胞質內充滿致密的分??泌顆粒（圖２Ａ和Ｂ）。在大鼠吸煙后，其胰島３細胞結構紊亂，并且分泌顆粒??明顯降低（圖２Ｃ）。在給予吸煙大鼠褪黑素后，Ｐ細胞的結構損傷程度....

圖４：胰島組織的凋亡分析

吸煙導致的大鼠血糖升高，與Ｐ細胞凋亡所引發的胰島素分泌降低密切相??關。Ｃａｓｐａｓｅ－３是細胞凋亡過程中最終的執行分子。胰島組織免疫組化檢測顯示??吸煙大鼠胰島組織高表達ｃａｓｐａｓｅ－３?（圖４Ａ），證實吸煙可誘發大鼠胰島組織發??生調亡。Ｃａｓｐａｓｅ－３在執行潤亡過程中需....

圖５：大鼠肝糖原的儲存

現吸煙不僅可以損傷胰島Ｐ細胞功能還可以干擾肝糖原合成。肝臟糖原染色顯??示，吸煙顯著降低大鼠肝臟組織糖原合成量。在給予吸煙大鼠褪黑素后，肝糖原??合成明顯增加，研究表明褪黑素可減少吸煙對肝糖原合成代謝的干擾（圖５）。??值得注意的是，在肝細胞糖原染色的局部放大圖中，吸煙大鼠肝臟細....

本文編號：4002487