本文選題：脊髓損傷　切入點：SOCS3　出處：《昆明醫科大學》2015年碩士論文

【摘要】：[背景]脊髓損傷(SCI)是神經外科常見的危急癥之一,為國際醫學難題,近年來隨著交通運輸及建筑業的發展,脊髓損傷的發病率亦呈逐年增高的趨勢。脊髓損傷具有高致殘率和低治愈率的特點,SCI損傷后往往遺留截癱、大小便失禁、行走困難等神經功能障礙,因此也喪失勞動能力,甚至喪失生活自理能力,不但給患者本人帶來巨大的痛苦,同時也給家庭社會帶來巨大的負擔。神經再生困難是困擾醫學界的難題之一,有必要深入研究SCI后神經再生。研究表明SCI損傷區域局部極為不利的微環境和膠質疤痕是神經再生的主要障礙。神經營養因子在神經再生和修復過程中一直扮演著舉足輕重的重要作用,神經營養因子-3(NT-3)是神經營養因子家族重要成員之一,脊髓損傷后損傷區域自身分泌的營養因子不足,而且同時存在抑制神經營養因子發揮作用的因素, 細胞因子抑制蛋白3(SOCS3)是抑制內源性神經營養因子的關鍵分子之一,從而導致軸突再生困難。單一的治療方式促進神經功能恢復作用有限,聯合治療是可能促進神經再生的策略,應用細胞移植不斷的供給外源性神經營養因子改善損傷區域局部極為不利的微環境,同時應用基因沉默技術抑制阻礙神經營養因子發揮作用的因素,即聯合內源性和外源性神經營養因子治療脊髓損傷,有可能治療脊髓損傷促進神經再生。[目的]聯合siRNA技術抑制阻礙神經營養因子發揮作用的因素和利用基因轉染技術來改善損傷區域的微環境,以此來達到促進神經再生修復的目的。[方法]①用貼壁法體外培養人體來源的臍帶間充質細胞(HUMSC),同時進行分離,提純和鑒定。②構建NT-3基因真核表達載體,利用基因轉染技術將其轉入HUMSC,構建NT-3- HUMSC細胞,體外檢測其存活情況及NT-3表達情況。③查閱文獻篩選作用于SOCS3的特異性靶點,進行序列同源性分析,設立陰性對照,設計并合成siRNA,同時在體外檢測功能。④建立SD大鼠脊髓損傷模型分為為：Ⅰ.假手術組10只；Ⅱ.T12全脊髓橫斷損傷模型40只,隨機分為4組,分別；生理鹽水治療組10只；siRNA + NT-3-HUMSCs治療組10只；NT-3-HUMSCs治療組10只；siRNA治療組10只。對于假手術組,僅打開椎板,暴露脊髓,但不損傷脊髓。其他試驗組術后6周橫斷損傷局部注射siRNA,7周后再次移植NT-3-HUMSCs、HUMSCs或NT-3。以上各組造模成功后,分別存活1,2月和3月進行運動功能評價和神經電生理監測。⑤對SD大鼠進行灌注固定和取材,觀察局部膠質疤痕降解情況和軸突再生情況,同時運用RT-PCR和Western blot檢測NT-3蛋白表達情況。實驗技術路線圖[結果]1)體外實驗證實經構建的NT-3-HUMSCs表達神經營養因子3較HUMSCs明顯增多且NT-3能夠促進誘導人臍帶基質細胞朝神經元方向分化。2) SOCS3-siRNA+NT-3-HUMSCs聯合治療SD大鼠脊髓損傷組BBB評分明顯高于NT-3-HUMSCs和SOCS3-siRNA和假手術組。差異有統計學意義(p0.05)3) SOCS3-siRNA+NT-3-HUMSCs聯合治療SD大鼠脊髓損傷組爬網格實驗表明神經功能恢復明顯高于NT-3-HUMSCs和SOCS3-siRNA和假手術組。差異有統計學意義(p0.05)。4) siRNA + NT-3-HUMSCs治療組較生理鹽水治療組橫斷脊髓空洞明顯縮小(p0.05),差異顯著5)追蹤結果表明iRNA+NT-3-HUMSCs治療組較生理鹽水治療組神經軸突生長明顯。6)神經電生理檢測損傷12周后治療組P40潛伏期較假手術組縮短,siRNA + NT-3-HUMSCs治療組較生理鹽水治療組比較潛伏期縮短明顯,波幅升高明顯,差異有顯著意義(p0.05)。[結論]NT-3-HUMSCs聯合基因沉默SOCS3可以改善外源性NT-3表達及SOCS3抑制作用增加內源性NT-3利用,改善局部微環境,從而達到促進損傷神經修復
[Abstract]:Neurotrophic factor - 3 ( NT - 3 ) plays an important role in promoting nerve regeneration .
2.T12 spinal cord transection injury model 40 rats were randomly divided into 4 groups , respectively ;
10 rats were treated with physiological saline ;
10 cases of siRNA + NT - 3 - HUMSCs treatment group ;
NT - 3 - HUMSCs treated group was 10 ;
The results showed that the expression of NT - 3 - HUMSCs and NT - 3 - HUMSCs could improve the expression of NT - 3 - HUMSCs .

【學位授予單位】：昆明醫科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R651.2

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 趙瑞峰,才書春,張強,張杰,晉記龍,靳建明;低場強MRI掃描對脊髓損傷的評價[J];山西臨床醫藥;2000年12期

2 關驊,唐和虎;脊髓損傷早期康復[J];中國康復理論與實踐;2000年04期

3 吳文堅;脊髓損傷的心理效應[J];國外醫學(創傷與外科基本問題分冊);2000年02期

4 詹海英;脊髓損傷患者的膀胱訓練[J];現代康復;2001年06期

5 于笑難,蔣品;脊髓損傷患者偏癱與血清瘦素的關系[J];現代康復;2001年20期

6 鄧寧;脊髓損傷的治療及研究展望[J];醫學文選;2001年06期

7 任少華;脊髓損傷患者的咳嗽閾值[J];中國康復;2001年04期

8 邱卓英 ,施紅梅 ,馬洪卓;脊髓損傷患者的心理特點及其康復策略[J];中華物理醫學與康復雜志;2002年06期

9 ;修復脊髓損傷的新方法[J];河南醫學研究;2002年04期

10 ;社區脊髓損傷患者對多方位擴大服務范圍的需求[J];中國臨床康復;2002年04期

相關會議論文 前10條

1 于鐵強;馮世慶;;216例外傷性脊髓損傷住院患者分析[A];第七屆全國創傷學術會議暨2009海峽兩岸創傷醫學論壇論文匯編[C];2009年

2 葉英;;骨髓間充質干細胞治療脊髓損傷的研究進展[A];中華醫學會急診醫學分會第十三次全國急診醫學學術年會大會論文集[C];2010年

3 張澤華;許以秀;黃小虹;;脊髓損傷早期康復進展[A];中國病理生理學會中專教育委員會會議論文集[C];2003年

4 呂衛軍;;脊髓損傷康復的觀察[A];中國康復醫學會第五屆全國康復治療學術會議論文集[C];2006年

5 孫陽;呂政;高敏;李勝活;;脊髓損傷早期康復在我院開展現狀及開展早期康復理由[A];中華醫學會第九次全國物理醫學與康復學學術會議論文集[C];2007年

6 吳波;任先軍;郭樹章;;少突膠質前體細胞移植治療脊髓損傷[A];第八屆全國脊柱脊髓損傷學術會議論文匯編[C];2007年

7 蔡培強;湯遜;;脊髓損傷的移植治療研究現狀及進展[A];第八屆全國脊柱脊髓損傷學術會議論文匯編[C];2007年

8 白躍宏;;脊髓損傷的康復[A];中國康復醫學會第五次全國老年康復學術大會上海市康復醫學會成立20周年暨老年康復診療提高班論文匯編[C];2008年

9 萬里;史文博;廖利民;;夜間陰莖勃起測定系統對不同平面脊髓損傷者的觀測[A];中華醫學會男科學分會第十三次全國男科學術會議論文集[C];2012年

10 周謀望;;脊髓損傷康復進展[A];2013浙江省物理醫學與康復學學術年會暨第八屆浙江省康復醫學發展論壇論文集[C];2013年

相關重要報紙文章 前10條

1 記者 于亞軍;首屆全國脊髓損傷外科治療與康復研討會在我市召開[N];呼和浩特日報(漢);2009年

2 ;北京：脊髓損傷發病率過高[N];健康時報;2003年

3 編譯 于娜;早期脊髓損傷有新療法[N];醫藥經濟報;2009年

4 通訊員　陳亞偉　記者　徐丹鹿;我國每年脊髓損傷者數萬人[N];光明日報;2003年

5 上海楊浦 朱群邦;脊髓損傷患者的家居環境改進[N];上海中醫藥報;2012年

6 上海浦東 陸至順;脊髓損傷患者的心理特征[N];上海中醫藥報;2013年

7 ;脊髓損傷康復趕早[N];保健時報;2005年

8 鄭穎t，

本文編號：1706737