為探討B細胞淋巴瘤/白血病-2和腺病毒E1B19 000相互作用蛋白3(B cell lymphoma/lewkmia-2 and adenovirus E1B19 000 interacting protein 3,BNIP3)在一氧化碳中毒引起的少突膠質細胞凋亡中的可能作用機制,選用C57BL/6小鼠建立一氧化碳中毒模型,40只雄性小鼠完全隨機分為5組(n=8):正常對照組(不給予CO氣體)、CO染毒后1d組,CO染毒后3 d組,CO染毒后7 d組,CO染毒后14 d組(CO染毒組均給予2 500~3 000 ppm CO氣體,40min)。通過免疫組織化學染色方法和蛋白免疫印跡法檢測小鼠腦組織內髓鞘堿性蛋白(myelin basic protein,MBP)和少突膠質細胞轉錄因子2(oligodendrocyte transcription factor2,Olig2)的表達,評價一氧化碳中毒后的髓鞘脫失及少突膠質細胞死亡程度;通過tunel凋亡相關檢測及透射電鏡證實少突膠質細胞的凋亡;采用蛋白免疫印跡技術檢測小鼠腦白質部位BNIP3蛋白、Bcl-2相關X蛋白(Bcl-2 Associated X Protein,Bax)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(cysteinyl aspartate specific proteinase9,caspase 9)的表達情況。與對照組相比,MBP在染毒后1 d表達開始降低(P0.05),3 d后表達持續降低(P0.01),7 d后降至最低(P0.01),直至14 d后其表達有所回升(P0.05),但仍低于對照組。采用蛋白免疫印跡法進行MBP的表達變化分析,與對照組比較,1 d組開始降低(P0.01),3 d組持續降低(P0.01),7 d組降到最低(P0.01),14 d組有一定恢復(P0.01)。Olig2在一氧化碳染毒3 d后表達較對照組升高顯著(P0.01);與對照組比較,蛋白免疫印跡中3d組顯著升高(P0.01)。采用tunel凋亡相關檢測胼胝體區凋亡細胞的陽性數百分比,與對照組比較,1 d組開始升高(P0.01),3 d組持續升高(P0.01),7 d組凋亡最明顯(P0.01),14 d組凋亡陽性細胞百分比同樣高于對照組(P0.01)。透射電鏡結果顯示胼胝體區少突膠質細胞在一氧化碳染毒后存在凋亡現象。與對照組相比,BNIP3在染毒后1 d組表達量明顯增高(P0.01),在3 d后開始降低(P0.01),至14 d后恢復正常(P0.05)。與對照組相比,Bax在染毒后1 d組表達明顯增加(P0.01),隨后的3 d(P0.01)和7 d組(P0.05)開始降低,至14 d組恢復正常(P0.05)。與對照組相比,caspase9在染毒后1 d組明顯增加(P0.01),3 d后降低(P0.01),7 d后恢復正常(P0.05),其表達變化趨勢與BNIP3基本相同。綜上所述,BNIP3參與了CO中毒引起的少突膠質細胞caspase依賴性線粒體凋亡途徑。
【學位單位】：河北北方學院
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：D919
【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
縮略詞表
前言
材料與方法
結果
附圖
附表
討論
結論
參考文獻
綜述 急性一氧化碳中毒遲發型腦病發病機制的研究進展
    參考文獻
致謝
個人簡歷

【參考文獻】

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2 董惠;李彬;郭芳;郭會彩;王永利;李春巖;;Na~+,K~+-ATP酶在大鼠皮質神經元缺氧性損傷中的作用[J];第二軍醫大學學報;2008年02期

3 曹義戰,薊光輝,晉興,王伯良,仲月霞,李金聲,李清波;高壓氧對大鼠海馬神經元Bcl-2蛋白表達的影響(英文)[J];中國臨床康復;2005年09期

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本文編號：2879275