目的:流行病學研究表明:氡與皮膚癌等皮膚相關疾病的發生具有相關性。但氡對于皮膚組織影響及機理尚未見報道。本研究旨在研究氡對于皮膚組織和細胞的影響及分子網絡變化。方法:通過建立染氡小鼠及皮膚成纖維細胞(WS1)模型,探究染氡對于皮膚組織及WS1細胞的影響,篩選皮膚組織差異蛋白和mi RNA,并通過體外實驗研究差異蛋白對皮膚細胞WS1生物學功能影響。(1)利用多功能生態氡室和多功能生態細胞氣體染毒裝置建立氡染毒小鼠(BALB/c和C57小鼠)模型和細胞染氡模型。通過對不同染氡劑量小鼠皮膚組織的HE染色、β-半乳糖苷酶染色、Masson染色,觀察小鼠皮膚組織損傷變化。通過對染氡細胞WS1的形態學觀察、MTT檢測、凋亡檢測、細胞周期檢測和細胞核染色,觀察皮膚細胞染氡后的變化;(2)收集染氡小鼠模型的皮膚組織蛋白,通過同位素標記相對和絕對定量(i TRAQ)技術和HPLC/MS技術,對對照組/染氡皮膚組織進行分析。通過數據庫搜索,對差異蛋白進行生物信息學分析;(3)采用mi RNA芯片篩選對照組/染氡皮膚組織中差異表達的mi RNA。(4)研究mi RNA對脂肪酸合成酶(FASN)的表達調控;(5)研究表達FASN對皮膚細胞生物功能的影響。結果:(1)染氡能夠引起小鼠皮膚組織的損傷,包括角質層變薄和缺損、皮膚組織的衰老以及皮膚組織內線粒體的腫脹形態變化;(2)染氡能夠抑制皮膚細胞WS1的增殖,增加細胞凋亡率,使細胞核形態發生變化,產生固縮和破碎;(3)通過蛋白組學,篩選出了3496個差異蛋白,其中上調超過1.8倍的45個,下調低于0.83的83個。篩選可能參與染氡對小鼠皮膚組織影響的上調蛋白:脂肪酸合成酶FASN;(4)通過mi RNA分析和靶基因預測,篩選出了57個差異mi RNA和5907個下游靶基因。通過Target Scan數據庫篩選出下調mi R206-3p和mi R378a-3p;(5)通過生物信息學分析建立了染氡后差異蛋白質和mi RNA的相互作用網絡。差異表達的mi R206-3p和mi R378a-3p能調控脂肪酸合成酶(FASN)的表達。過表達FASN對皮膚細胞WS1增殖產生了抑制,引起了細胞周期S期的阻滯,同時還增加了細胞凋亡率和破壞了細胞核形態。結論:氡能夠引起皮膚組織和細胞的變化甚至損傷,影響其生物學功能;氡能引起的皮膚組織一系列的蛋白質和mi RNA差異變化;差異表達的mi R206-3p和mi R378a-3p能調控FASN的表達;過表達差異蛋白FASN能夠影響皮膚細胞增殖,增加凋亡等。
【學位單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：R818
【部分圖文】：

miRNA加工過程

將 transwell 培養皿置于細胞氣體染毒裝置染毒，見圖 2。對細胞直接染毒，膜下方通過培養基保持細胞濕潤。氧氣濃mL/min，染毒時間為 30min，暴露氡濃度為 20000Bq/m3。1 代（記作 HR-1）。收集細胞常規培養，進行下一代染毒。

同劑量的氡染毒后，小鼠皮膚組織真皮組織及毛囊等皮膚附屬結構依然清晰。但隨著染氡劑量的增加，皮膚組織表皮逐漸變現了明顯的腫脹，在 120WLM 的 BALB/c 小鼠皮膚組中，甚至失（圖 1.1.1 箭頭所示）。同樣的角質層變薄的現象也出現在了
【參考文獻】

相關期刊論文 前4條

1 苗超,仲恒高,孫靜,聶繼華,蘇世標,童建;氡及其子體對小鼠血液和骨髓細胞的影響[J];中國血液流變學雜志;2005年02期

2 李冰燕,童建;氡及其子體對大鼠靶器官損傷的研究[J];衛生毒理學雜志;2004年03期

3 李冰燕,童建;氡及其子體對大鼠免疫器官的影響[J];中華放射醫學與防護雜志;2004年03期

4 ;Mitochondrial microsatellite instability in gastric cancer and its precancerous lesions[J];World Journal of Gastroenterology;2004年06期

本文編號：2884438