1.背景骨缺損一直是骨科的難題,關(guān)于其機(jī)制研究主要集中在成骨與血管生成相互關(guān)聯(lián),最近的報(bào)道發(fā)現(xiàn)小鼠骨組織存在一種特殊血管亞型H型(CD31^hiEmcn^hi)血管,其維持骨內(nèi)獨(dú)特的代謝微環(huán)境,積極調(diào)控骨骼的形成。有研究發(fā)現(xiàn)H型血管在骨損傷修復(fù)早期（14天）大量出現(xiàn),相關(guān)成骨因子與其密切關(guān)聯(lián)。然而,對(duì)于骨內(nèi)H型血管在整個(gè)損傷修復(fù)周期,尤其是大段骨缺損下的愈合過(guò)程中是否存在作用呢?目前尚未有文獻(xiàn)報(bào)道。因此,進(jìn)一步研究H型血管機(jī)制作用顯得尤為重要,同時(shí)對(duì)股骨節(jié)段性缺損治療具有重要的指導(dǎo)意義。2.目的2.1用不同濃度去鐵胺（Desferrioxamine,DFO）作用于大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（Bone Marrow Mesenchyml Stem Cells,BMSCs）及內(nèi)皮細(xì)胞（Endotheliocyte Cells,ECs）,確定最佳的藥物濃度,探討DFO的成骨和血管生成作用;2.2使用明膠微球（Gelatin Microspheres,GMs）載藥方法記錄藥物體外緩釋情況,評(píng)估進(jìn)一步體內(nèi)凝膠載藥微球支架修復(fù)股骨大段缺損的可行性;2.3構(gòu)建大鼠骨缺...

【文章頁(yè)數(shù)】：64 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1 大鼠BMSCs形態(tài)特征

接種后第2天觀察可見(jiàn)大量紅細(xì)胞與少量BMSCs集合性混合生長(zhǎng)（圖1A）。第3天,細(xì)胞集落明顯濃密,細(xì)胞呈梭形或多角形,排列較整齊（圖1B）,待克隆融合率達(dá)到約50%⁷0%時(shí)傳代。第4天,第一代干細(xì)胞生長(zhǎng)方式和原代細(xì)胞相似,但增殖速度明顯加快,呈單層均勻生....

圖2 DFO對(duì)BMSCs成骨分化能力的影響

為了研究DFO是否通過(guò)Hif-1α途徑促進(jìn)BMSCs向成骨方向分化。我們加入不同濃度的DFO和DFO+PX-478,同時(shí)用成骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基培養(yǎng)。從結(jié)果中可以看到,培養(yǎng)7天后的加入DFO的BMSCs細(xì)胞成骨分化能力強(qiáng),均強(qiáng)于DFO+PX-478組,其中濃度為60μmol/L組成骨....

圖3 DFO對(duì)ECs介導(dǎo)的血管網(wǎng)絡(luò)形成的影響

為了研究DFO在Hif-1α途徑中對(duì)大鼠胸主動(dòng)脈ECs的血管網(wǎng)絡(luò)的影響,行體外成管實(shí)驗(yàn)。顯微鏡下觀察結(jié)果顯示與PBS組相比,ECs經(jīng)過(guò)DFO干預(yù)6h后明顯增加了血管網(wǎng)絡(luò)形成,此外,DFO+PX-478組顯示PX-478抑制了血管網(wǎng)絡(luò)形成(圖3A)。使用AngioTool軟件進(jìn)....

圖4 DFO-GMs和PX-478-GMs藥物釋放曲線

紫外分光光度法重復(fù)測(cè)量3批DFO-GMs和PX-478-GMs樣品,計(jì)算得到DFO-GMs載藥量及包封率為(3.12±0.22)%和(86.24±3.34)%,PX-478-GMs為(3.01±0.28)%和(82.24±2.34)%。體外藥物釋放結(jié)果表明,載藥明膠微球具有良好的....

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